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Sulfo-NHS-SS-Biotin伯胺反应性的生物素化试剂

Sulfo-NHS-SS-Biotin

产品编号:A8005
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Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.

引用文献

1. Carrington S, Hernandez C, et al. "G protein-coupled receptors differentially regulate glycosylation and activity of the inwardly rectifying potassium channel Kir7.1." J Biol Chem. 2018 Sep 26. pii: jbc.RA118.003238. PMID:30257863
2. Brasher MI, Martynowicz DM, et al. "Interaction of Munc18c and Syntaxin4 facilitates invadopodium formation and extracellular matrix invasion of tumour cells." J Biol Chem. 2017 Aug 10. pii: jbc.M117.807438. PMID:28798239

质量控制

化学结构

Sulfo-NHS-SS-Biotin

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化学性质

CAS号 325143-98-4 SDF Download SDF
别名 Biotin disulfide N-hydroxysulfosuccinimide ester
化学名 sodium;1-[3-[2-[5-[(3aS,4S,6aR)-2-oxo-1,3,3a,4,6,6a-hexahydrothieno[3,4-d]imidazol-4-yl]pentanoylamino]ethyldisulfanyl]propanoyloxy]-2,5-dioxopyrrolidine-3-sulfonate
SMILES C1C(C(=O)N(C1=O)OC(=O)CCSSCCNC(=O)CCCCC2C3C(CS2)NC(=O)N3)S(=O)(=O)[O-].[Na+]
分子式 C19H27N4NaO9S4 分子量 606.7
溶解度 ≥30.335mg/mL in DMSO 储存条件 Store at -20°C
该产品在溶液中不稳定,建议现配现用
运输条件 试用装:蓝冰运输。
其他可选规格:常温运输或根据您的要求用蓝冰运输。
一般建议

Sulfo-NHS-LC-Biotin是湿度敏感的,如果试剂冷藏保存,在打开前将试剂瓶完全平衡到室温,以避免容器内的湿气凝结。该生物素试剂必须现配现用,不要准备储存溶液。避免使用含有伯胺(例如Tris或甘氨酸)的缓冲液。

生物活性

描述 Sulfo-NHS-SS-Biotin是一种水溶性的生物素化试剂。
靶点            
IC50            

实验操作

生物素化方法[1]:

样品

468/EV 细胞和468/uPAR 细胞

溶解方法

可以溶于水中,为了获得更高的浓度,可以将离心管在37℃加热10分钟和/或在超声波浴中震荡一段时间。

反应条件

1 mg/ml, 冰上15分钟

应用

细胞悬液(1.5×106)用预冷的PBS洗三次后与1mg/mL sulfo-NHS-SS-biotin混合,在冰上放置15分钟。用含100 mmol/L谷氨酸的PBS能够终止生物素化反应。细胞经过PBS清洗后,用含蛋白酶抑制剂的RIPAh缓冲液(20 mmol/L sodium phosphate, 150 mmol/L NaCl (pH 7.4), 1% NP40, 0.1% SDS, and 0.5% deoxycholic acid)重悬。生物素化的膜蛋白用链霉亲和素琼脂糖拉下来,用SDS样品缓冲液洗脱出来,经过SDS-PAGE,电转到PVDF膜上, 最后用抗体进行杂交。

References:

[1]. Minji Jo, Boryana M. Eastman, Drue L. Webb, et al. Cell Signaling by Urokinase-type Plasminogen Activator Receptor Induces Stem Cell-like Properties in Breast Cancer cells . Cancer Res , 2010;70:8948-8958

产品描述

Sulfo-NHS-SS-biotin是一种胺反应性的生物素化试剂。Sulfo-NHS-SS-biotin含有带负电荷的磺酸基,使其分子内产生足够的极性,可以直接加入到反应性水溶液中,而不需要提前溶解在有机溶剂中。尽管不需要提前溶解,sulfo-NHS-SS-biotin的水溶性原液必须快速制备并立即使用,以防止活性酯的水解。Sulfo-NHS-SS-biotin与含胺的蛋白或其它分子反应形成一个复合体,该复合体进一步与亲和素或链霉素探针相互作用,用亲和层析的方法纯化目标分子。

参考文献:
Bioconjugate Techniques , 2nd ed.  By Greg T.Hermanson  (Pierce Biotechnology, Thermo Fisher Scientific, Rockford, IL).  Academic Press  (an imprint of Elsevier):  London, Amsterdam, Burlington, San Diego . 2008. ISBN 978-0-12-370501-3.