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Iodoacetyl-LC-Biotin

 
Catalog No.
A8009
巯基反应性的生物素化试剂
组合的产品项目
规格价格库存 数量
100mg
¥ 1,681.00
现货

电话: 021-55669583

邮箱: sales@apexbio.cn

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A

背景

Iodoacetyl-LC-Biotin全名为N-iodoacetyl-N-biotinylhexylenediamine,是一种不溶于水的巯基反应性生物素化试剂,需要合适的溶剂,包括二甲基亚砜(DMSO)和二甲基甲酰胺(DMF),在加入到含水反应之前需要先将其溶解。Iodoacetyl-LC-Biotin含有一个生物素双环结构,一个1,6-二氨基己烷间隔臂,连接到生物素的戊酸侧链,臂末端的碘乙酰基提供巯基反应,Iodoacetyl-LC-Biotin末端的碘乙酰基能够与蛋白质和其他分子上的巯基反应形成不可逆键。Iodoacetyl-LC-Biotin的长间隔臂能够使修饰的分子更好地结合至亲和素或链霉亲和素探针。

参考文献:
Bioconjugate Techniques , 2nd ed.  By Greg T.Hermanson (Pierce Biotechnology, Thermo Fisher Scientific, Rockford, IL). Academic Press (an imprint of Elsevier): London, Amsterdam, Burlington, San Diego . 2008. ISBN 978-0-12-370501-3.

文献引用

1.McShane, Adam Jay. "Novel Chemical Tools and Methods for Quantitative Mass Spectrometry-Based Proteomics." (2015).

Features

• Protein labelingbiotinylate antibodies or other proteins for use in protein methods
• Intracellular labeling—membrane-permeable, can be used to label inside cells
• Thiol-reactive—reacts with sulfhydryls (-SH), such as the side-chain of cysteine (C)
• Iodoacetyl-activated—perform reactions in the dark at pH 7.5 to 8.5 in Tris or borate buffer
• Irreversible—forms permanent amide bonds; spacer arm cannot be cleaved
• Solubility—water insoluble, must be dissolved in DMSO or DMF before further dilution in aqueous buffers
• Medium length—spacer arm is 27.1 angstroms; contains hexylenediamine extension

化学属性

Physical AppearanceA solid
StorageStore at -20°C
M.Wt510.43
Cas No.93285-75-7
FormulaC18H31IN4O3S
SynonymsN-Biotinyl-N'-(iodoacetyl)-1,6-hexanediamine,Iaa-biotin
Solubility≥51 mg/mL in DMSO with gentle warming; insoluble in EtOH; insoluble in H2O
Chemical Name5-[(3aS,4S,6aR)-2-oxo-1,3,3a,4,6,6a-hexahydrothieno[3,4-d]imidazol-4-yl]-N-[6-[(2-iodoacetyl)amino]hexyl]pentanamide
SDFDownload SDF
Canonical SMILESC1C2C(C(S1)CCCCC(=O)NCCCCCCNC(=O)CI)NC(=O)N2
运输条件 蓝冰运输或根据您的需求运输。
一般建议不同厂家不同批次产品溶解度各有差异,仅做参考。若实验所需浓度过大至产品溶解极限,请添加助溶剂助溶或自行调整浓度。溶液形式一般不宜长期储存,请尽快用完。

试验操作

生物素化方法[1]:

样品

IgG

溶解方法

可以溶于有机溶剂DMSO或者DMF。

反应条件

4mM, 室温90min

应用

免疫球蛋白G(26.7 nmol)用1ml含0.1M磷酸钠和5Mm EDTA,pH 6的缓冲液溶解。在此溶液中,加入DTT使得其在溶液中的浓度为50mM,37℃室温孵育90min,然后冷却到室温。多余的DTT用pH 8.3,50mM Tris通过分子筛层析法去除,5mM EDTA用作洗脱液。随后对具有还原巯基的IgG进行生物素化,溶于Me2SO的30 μl浓度为4 mM的 iodoacetyl-LC-biotin溶液加入,混合物在室温下避光孵育90min。最后,残留的生物素化试剂和游离的生物素用pH 7.2,0.1mM 的PBS通过72小时透析除去。BCA 蛋白试验用来确定溶液中蛋白的浓度,与IgG共价结合的总biotin 通过链霉素结合试验进行检测。

References:

[1]. Anna Bogusiewicz,Nell I. Mock, and Donald M. Mock. Instability of the biotin–protein bond in human plasma. Analytical Biochemistry 327 (2004) 156–161.

生物活性

Description Iodoacetyl-LC-Biotin是卤代乙酰活化的巯基反应性生物素化试剂。
靶点 protein cysteines molecules containing sulfhydryl groups        
IC50            

质量控制