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EX 527 (SEN0014196)

现货
Catalog No.
A4181
SIRT1抑制剂
组合的产品项目
规格价格库存 数量
50mg
¥ 1,800.00
现货
10mM (in 1mL DMSO)
¥ 500.00
现货
10mg
¥ 500.00
现货
25mg
¥ 1,100.00
现货

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Background

EX 527 (SEN0014196) is a novel, potential, and specific small-molecule inhibitor of SIRT1 catalytic activity to examine the role of SIRT1 in p53 acetylation and cell survival after DNA damage. Significantly, inhibition of SIRT1 catalytic activity by EX 527 had no effect on cell growth, viability, or p53-controlled gene expression in cells treated with etoposide. EX-527 is found to be 200- to 500-fold more selective for SIRT1 than SIRT2 and SIRT3. EX-527 is a racemic mixture, and its optical isomers were separated by chiral high-performance liquid chromatography and designated EX-242 and EX-243.

Reference

Jonathan M. Solomon, Rao Pasupuleti, Lei Xu, Thomas McDonagh, Rory Curtis, Peter S. DiStefano, L. Julie Huber. Inhibition of SIRT1 Catalytic Activity Increases p53 Acetylation but Does Not Alter Cell Survival following DNA Damage. Molecular Cellular Biology January 2006 vol. 26 no. 1 28-38.

文献引用

1. Tian L, Cao W, et al. "Pretreatment with Tilianin improves mitochondrial energy metabolism and oxidative stress in rats with myocardial ischemia/reperfusion injury via AMPK/SIRT1/PGC-1 alpha signaling pathway." J Pharmacol Sci. 2019 Apr;139(4):352-360. PMID:30910451

Chemical Properties

Physical AppearanceA solid
StorageStore at -20°C
M.Wt248.71
Cas No.49843-98-3
FormulaC13H13ClN2O
SynonymsEX-527,SIRT1 Inhibitor III,SEN0014196,EX527
Solubility≥12.4 mg/mL in DMSO, ≥25.45 mg/mL in EtOH with ultrasonic, <2.5 mg/mL in H2O
Chemical Name6-chloro-2,3,4,9-tetrahydro-1H-carbazole-1-carboxamide
SDFDownload SDF
Canonical SMILESClC1=CC2=C(C=C1)NC3=C2CCCC3C(N)=O
运输条件试用装:蓝冰运输。 其他可选规格:常温运输或根据您的要求用蓝冰运输。
一般建议为了使其更好的溶解,请用37℃加热试管并在超声波水浴中震动片刻。不同厂家不同批次产品溶解度各有差异,仅做参考。若实验所需浓度过大至产品溶解极限,请添加助溶剂助溶或自行调整浓度。

试验操作

激酶实验 [1]:

GST-SIRT1去乙酰化酶活性抑制试验

在pDEST27 Gateway载体中,采用FuGENE-6,使GST标记的人SIRT1暂时转染到293T细胞中。 48小时后,用50 mM Tris,pH 8.0,120 mM NaCl,1 mM EDTA和0.5% Nonidet P-40裂解细胞,再加入Complete Mini蛋白酶抑制片。使用谷胱甘肽-琼脂糖凝胶珠,从裂解物中纯化GST-SIRT1,用上述缓冲液对其进行冲洗。在EX 527 (48 pM ~ 100 μM) 存在的情况下,使用30 ng GST-SIRT1进行脱乙酰化反应。使用Fluor de Lys试剂盒测定脱乙酰化作用,其中,Fluor de Lys试剂盒含荧光肽(含p53的379 ~ 382残基,而且赖氨酸382位点被乙酰化)。乙酰化赖氨酸残基与氨基甲基香豆素部分耦合。SIRT1使多肽脱乙酰化。随后加入蛋白水解显影剂,释放氨基甲基香豆素荧光。将酶与170 μM NAD+以及100 μM p53荧光肽置于37 °C下孵育45分钟,随后将其置于显影剂中,于37 °C下孵育15分钟。在360 nm激发光和460 nm发射光处,测定其荧光值,用相对荧光单位表示酶活性。

细胞实验 [1]:

细胞系

NCI-H460、MCF-7、U-2 OS和HMEC细胞

制备方法

在DMSO中的溶解度大于10 mM。若配制更高浓度的溶液,一般步骤如下:请将试管置于37 °C加热10分钟和/或将其置于超声波浴中震荡一段时间。原液于-20 °C可放置数月。

反应条件

1 μM;48或72小时

实验结果

在经Etoposide处理的细胞中,EX 527抑制SIRT1催化活性,但对细胞生长、存活或p53调控的基因表达没有影响。

动物实验 [2]:

动物模型

雄性SD大鼠

给药剂量

1至5 ~ 10 μg,体系总体积为5 μL;脑室注射

实验结果

EX527 (~ 10 μg)抑制下丘脑SIRT1活性,从而提升下丘脑乙酰化p53水平。

其它注意事项

请于室内测试所有化合物的溶解度。虽然化合物的实际溶解度可能与其理论值略有不同,但仍处于实验系统误差的允许范围内。

References:

[1]. Jonathan M. Solomon, Rao Pasupuleti, Lei Xu, Thomas McDonagh, Rory Curtis, Peter S. DiStefano, L. Julie Huber. Inhibition of SIRT1 Catalytic Activity Increases p53 Acetylation but Does Not Alter Cell Survival following DNA Damage. Molecular Cellular Biology January 2006 vol. 26 no. 1 28-38.

[2]. Velásquez DA, Martínez G, Romero A, Vázquez MJ, Boit KD, Dopeso-Reyes IG, López M, Vidal A, Nogueiras R, Diéguez C. The central Sirtuin 1/p53 pathway is essential for the orexigenic action of ghrelin. Diabetes. 2011 Apr;60(4):1177-85.

生物活性

Description EX 527是有效的SIRT1选择性抑制剂,其IC50值为98 nM。
靶点 SIRT1          
IC50 98 nM          

质量控制

化学结构

EX 527 (SEN0014196)

相关生物数据

EX 527 (SEN0014196)