Splitomicin

Splitomicin是Sir2p的选择性抑制剂，IC50值为60 μM。Splitomicin也是fMLP诱导的自由基抑制剂，IC50值为40.79 ± 9.85 μM[1，3]。

对Sir2p的HDA的抑制最可能的机制是通过Splitomicin使Sir2p的表型改变。Splitomicin 直接影响Sir2p的脱乙酰酶活性。此外，Splitomicin特定地抑制fMLP诱导的超氧化物阴离子的释放。

在体外，Splitomicin抑制NAD+依赖的Sir2蛋白的组蛋白脱乙酰活性，IC50值为60 μM。从过表达酵母SIR2的hst2菌株中提取的全酵母细胞存在的情况下，使用一个[3H]乙酰化的组蛋白H4肽，测量NAD+依赖的游离[3H]醋酸的释放，获得一个细胞提取物。结果表明Splitomicin的直接影响Sir2p的脱乙酰酶活性。此外，在不同的Splitomicin浓度下，使用流式细胞分析仪观察fMLP(1 μM)或PMA(100 nM))诱导的中性粒细胞，研究细胞内超氧化物阴离子的产生。Splitomicin抑制fMLP诱导的Mac-1表达并提高人中性粒细胞中cAMP水平[1，3]。

Splitomicin的萘基可能负责对血小板的抑制作用。通过使用人类血小板，研究Splitomicin对血小板聚集的抑制作用，监控凝血酶(0.1 U/ml)、胶原蛋白(2 μg/ml)、花生四烯酸(0.5 mM)、U46619(2 μM)或ADP(10 μM)诱导的血小板聚集和ATP的释放。Splitomicin以浓度依赖方式抑制血小板聚集。Splitomicin提高cAMP水平，当Splitomicin(150 μM)结合PGE1(0.5 μM)时，这种抑制效应增强。Splitomicin对血小板聚集的抑制机制可能是通过抑制环AMP磷酸二酯酶活性、细胞内随后的钙离子的运动、TXB2的形成和ATP的释放来增加环AMP水平[2]。

参考文献：
[1]. Bedalov A, Gatbonton T, Irvine WP, et al. Identification of a small molecule inhibitor of Sir2p. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America, 2001, 98(26): 15113-15118.
[2]. Liu FC, Liao CH, Chang YW, et al. Splitomicin suppresses human platelet aggregation via inhibition of cyclic AMP phosphodiesterase and intracellular Ca++ release. Thrombosis Research, 2009, 124(2): 199-207.
[3]. Liu FC, Day YJ, Liou JT, et al. Splitomicin inhibits fMLP-induced superoxide anion production in human neutrophils by activate cAMP/PKA signaling inhibition of ERK pathway. European Journal of Pharmacology, 2012, 688: 68-75.