Leupeptin, Microbial
mRNA synthesis
In vitro transcription of capped mRNA with modified nucleotides and Poly(A) tail
Tyramide Signal Amplification (TSA)
TSA (Tyramide Signal Amplification), used for signal amplification of ISH, IHC and IC etc.
Phos Binding Reagent Acrylamide
Separation of phosphorylated and non-phosphorylated proteins without phospho-specific antibody
Cell Counting Kit-8 (CCK-8)
A convenient and sensitive way for cell proliferation assay and cytotoxicity assay
SYBR Safe DNA Gel Stain
Safe and sensitive stain for visualization of DNA or RNA in agarose or acrylamide gels.
Inhibitor Cocktails
Protect the integrity of proteins from multiple proteases and phosphatases for different applications.
Leupeptin是一种可逆的蛋白酶抑制剂,作用于牛胰蛋白酶、人纤溶酶、牛脾组织蛋白酶B和重组人钙蛋白酶,Ki值分别为35 nM、3.4 μM、6 nM和72 nM [1,2]。
作为蛋白酶的抑制剂,leupeptin最初是从链霉菌属中分离的。由于极性C端的存在,leupeptin膜通透性差。Leupeptin对猪红细胞、猪肾和人血小板来源的钙蛋白酶具有中度有效的活性,IC50值分别为0.211 μM、1.8 μM和0.938 μM。在培养的MRC-C细胞中,leupeptin通过抑制胰蛋白酶的活性,从而抑制人类冠状病毒株229E的生长,平均IC50值为0.8 μM [2,3]。
参考文献:
1. Mehdi S. Cell-penetrating inhibitors of calpain. Trends in biochemical sciences, 1991, 16: 150-153.
2. Krauser J A, Powers J C. 6.1 BIOLOGICAL ROLES. Proteinase and Peptidase Inhibition: Recent Potential Targets for Drug Development, 2003: 144.
3. Appleyard G, Tisdale M. Inhibition of the growth of human coronavirus 229E by leupeptin. Journal of general virology, 1985, 66(2): 363-366.
- 1. Vimala Bondada, Jozsef Gal, et al. "The C2 domain of calpain 5 contributes to enzyme activation and membrane localization." Biochim Biophys Acta Mol Cell Res. 2021 Jun;1868(7):119019. PMID:33811937
- 2. HeLia, GuanghuiDanga, et al. "Characterization of a novel Mycobacterium tuberculosis serine protease (Rv3194c) activity and pathogenicity." Tuberculosis. Available online 4 November 2019, 101880.
Storage | Store at -20°C该产品在溶液中不稳定,建议现配现用 |
M.Wt | 524.63 |
Cas No. | 103476-89-7 |
Formula | C20H38N6O4·H2SO4 |
Synonyms | Leupeptin hemisulfate salt microbial,L-Leucinamide,Leupeptin, Microbial |
Solubility | ≥24.7 mg/mL in DMSO; ≥53.5 mg/mL in EtOH; ≥54.4 mg/mL in H2O |
Chemical Name | (S)-2-acetamido-N-((S)-1-(((S)-5-guanidino-1-oxopentan-2-yl)amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl)-4-methylpentanamide sulfate |
SDF | Download SDF |
Canonical SMILES | O=C([C@@H](NC(C)=O)CC(C)C)N[C@@H](CC(C)C)C(N[C@H](C=O)CCCNC(N)=N)=O.OS(O)(=O)=O |
运输条件 | 蓝冰运输或根据您的需求运输。 |
一般建议 | 不同厂家不同批次产品溶解度各有差异,仅做参考。若实验所需浓度过大至产品溶解极限,请添加助溶剂助溶或自行调整浓度。溶液形式一般不宜长期储存,请尽快用完。 |
细胞实验 [1]: | |
细胞系 |
感染了HCV 229E的MRC-C细胞 |
制备方法 |
在DMSO中的溶解度 ≥49.35 mg/mL。若配制更高浓度的溶液,一般步骤如下:请将试管置于37℃加热10分钟和/或将其置于超声波浴中震荡一段时间。原液于-20℃可放置数月。 |
反应条件 |
0, 1, 10和100 μg/mL;24小时 |
实验结果 |
在MRC-C细胞培养液中,Leupeptin抑制人冠状病毒229E复制。空斑实验表明,Leupeptin的IC50值为0.4 μg/mL。当Leupeptin剂量为50 μg/mL时,宿主细胞生长不受影响。在病毒单周期生长实验中,于感染后2小时内加入Leupeptin(100 μg/mL)才能抑制病毒增殖,上述结果表明其作用于病毒复制的早期阶段。 |
动物实验 [2]: | |
动物模型 |
C57BL/6NCrl雄性小鼠 |
给药剂量 |
0, 9, 18 36和40 mg/kg;腹腔注射 |
实验结果 |
小鼠对Leupeptin的耐受性良好。在总组织提取物和溶酶体富集部分(LE部分)中,Leupeptin呈剂量依赖性地大量增加LC3b-II。在电子显微镜(EM)的水平下,Leupeptin诱导电子致密囊泡结构(在肝细胞中,给予40 mg/kg Leupeptin,于60分钟后,可以显示上述结构)堆积。结果表明,Leupeptin使LC3b-II免受溶酶体降解,从而提升LC3b-II的体内水平。因此,基于Leupeptin的测试有望用于研究小鼠巨自噬动态平衡。 |
其他注意事项 |
请于室内测试所有化合物的溶解度。虽然化合物的实际溶解度可能与其理论值略有不同,但仍处于实验系统误差的允许范围内。 |
References: [1]. Appleyard G, Tisdale M. Inhibition of the growth of human coronavirus 229E by leupeptin. Journal of general virology, 1985, 66(2): 363-366. [2]. Haspel J, Shaik RS, Ifedigbo E, Nakahira K, Dolinay T, Englert JA, Choi AM. Characterization of macroautophagic flux in vivo using a leupeptin-based assay. Autophagy. 2011 Jun;7(6):629-42. |
描述 | Leupeptin, Microbial(Leupeptin hemisulfate)是一种可逆的和竞争性的蛋白酶抑制剂,作用于胰蛋白酶(trypsin)和组织蛋白酶B(cathepsin B),Ki值分别为0.13 nM和7 nM。 | |||||
靶点 | Trypsin | Cathepsin B | ||||
IC50 | 0.13 nM (Ki) | 7 nM (Ki) |
质量控制和MSDS
- 批次: