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Cell Counting Kit-8 (CCK-8)

Catalog No.
K1018
用于细胞增殖和细胞毒性试验
组合的产品项目
规格价格库存 数量
1x1ml (100 tests)
¥ 200.00
现货
1x5ml (500 tests)
¥ 600.00
现货
2x5ml (1000 tests)
¥ 1,000.00
现货
6x5ml (3000 tests)
¥ 2,400.00
现货
20x5ml (10000 tests)
¥ 7,200.00
现货

电话: 021-55669583

邮箱: sales@apexbio.cn

全球经销商

文献引用

Description

我们的产品Cell Counting Kit-8(CCK-8)相比以前的方法为细胞数测定和细胞增殖/毒性检测提供了更方便和灵敏的方法。试剂盒使用了一种高水溶性的四唑盐,WST-8,它在电子耦合试剂存在下还原产生水溶性formazan形式的染料。由脱氢酶产生的formazan的量与活细胞的数量呈直接的线性关系。CCK-8的检测灵敏度高于其他方法,如MTT,XTT,MTS或WST-1等。

CCK-8法的优势

Features

More Sensitive than MTT, MTS, or WST-1

No Toxicity to Cell

Simpler Steps, No organic solvents required

Stable One Bottle Solution, ready-to-use

Advantages

质量控制

质量控制和DataSheet

批次:

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Components and Storage

100 tests 1x1ml
500 tests 1x5ml
1000 tests 2x5ml
3000 tests 6x5ml
10000 tests 20x5ml
CCK-8在0-5 °C下,避光保存,储存时间超过一年。如需更长时间储存,请将其储存在-20°C。反复冻融会导致背景增加,干扰您的检测。如果频繁使用,请将试剂盒存放在0-5°C。

Specialty

比MTT,MTS或WST-1更敏感

对细胞无毒性

步骤更简单,无需有机溶剂

稳定的试剂,即用型

常见问题解答 (FAQs)

1)Q:每个孔需要接种的细胞数量是多少?

A:对于贴壁细胞,每孔至少需要1000个细胞(100 μl培养基)。对于白细胞,由于灵敏度较低,每孔至少需要2500个细胞(100 μl培养基)。推荐的96孔板每孔最大细胞数为25000。如果使用24孔或6孔板进行该检测,请计算相应的每孔的细胞数,并调整CCK-8的体积,使其为每孔总液体体积的10%。

2)Q:CCK-8对细胞的毒性大小如何?

A:CCK-8的毒性非常低,在CCK-8测定完成后,相同的细胞可用于其他细胞增殖测定,例如结晶紫测定,中性红测定或DNA荧光测定。(除非细胞极为稀少,不推荐把CCK-8测定过的细胞用于其它实验。)

3)Q:怎么设置空白对照?

A:在不含有细胞的培养基中加入CCK-8,酶标仪检测450 nm的吸光度;若做药物刺激实验,可在不含细胞、含药物的培养基中加入CCK-8。酶标仪检测450 nm的吸光度作为空白对照。

4)Q:CCK-8能否用于细胞染色?

A:CCK-8不能用于细胞染色,CCK-8检测原理是高水溶性的四唑盐WST-8在电子耦合试剂存在下还原产生水溶性formazan形式的染料,WST-8及formazan是高度水溶性的,不会进入细胞内对细胞进行染色。

5)Q:没有450 nm的滤光片,能否使用其他滤光片?

A:如果您没有450 nm滤光片。您也可以使用吸光度在430 nm和490 nm之间的滤光片, 450 nm滤光片具有最佳灵敏度。

6)Q:哪些物质会干扰CCK-8的测定?

A:WST-8可能与还原剂反应生成WST-8 formazan,如果使用还原剂(例如一些抗氧化剂)会增加OD值;若存在氧化性物质则会抑制CCK-8测定反应,减小OD值;此外,培养基中的酚红不会影响实验结果,酚红的吸光度可以在计算时,通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去。

7)Q:在做药物刺激实验时,药物对测定是否有影响?

A:如果药物有还原性,则会与CCK-8发生反应,影响吸光度;药物中金属离子的存在可能会影响CCK-8的灵敏度。终浓度为1 mM 的氯化亚铅、氯化铁、硫酸铜会抑制5% 、15% 、90%的显色反应,使灵敏度降低。如果终浓度是10 mM 的话,将会100%抑制。

8)Q:如果吸光度值太低,可以采取什么办法?

A:适当增加细胞数量或延长加入CCK-8溶液后的孵育时间。

9)Q:如果吸光度值太高,可以采取什么办法?

A:适当减少细胞数量(建议正式实验前优化细胞数量与荧光值之间的关系)或缩短加入CCK-8溶液后的孵育时间。