Research Solutions for Coronavirus
冠状病毒是一大类病毒的总称,在电子显微镜下可以观察到它们的表面有棒状粒子凸起,形状类似皇冠。冠状病毒可分为α、β、γ、δ4个属。 新型冠状病毒(SARS-CoV-2,之前称为2019-nCoV)是一种冠状病毒科β属单链RNA病毒,通过S蛋白结合人ACE2受体进入细胞,利用RNA依赖性RNA聚合酶(RdRp)进行复制。目前针对新冠病毒尚无特效药。APExBIO提供多个高效的化合物库协助全球研究机构和科研人员筛选和开发新冠病毒的候选药物,还提供逆转录和qPCR系列产品帮助有效检测新冠病毒,以及mRNA体外合成平台助力mRNA疫苗的研发。
一、2019-nCoV相关抑制剂
APExBIO作为小分子抑制剂等产品的专业供应商,提供多种与2019-nCoV相关的抑制剂(目前为止发现的)。
二、高通量筛选化合物库
除了以上化合物库,我们还提供定制服务,您可以选择化合物的种类、数量、规格、浓度、形式(粉末/溶液)以及版图。
三、逆转录酶和qPCR系列
图1 新冠病毒S基因的qPCR扩增曲线。起始模板量分别是10/20/200 Copies。用2X SYBR Green qPCR Master Mix(货号K1070)对DNA进行荧光定量。
图2 人β-Actin的qPCR扩增曲线。使用2X SYBR Green qPCR Master Mix(货号K1070)对7个不同浓度(10 ng-15.625 pg)的模板进行定量,每组4个重复。
图3 人β-Actin的qPCR扩增曲线。从293A细胞中提取RNA,梯度稀释至7个不同浓度( 1μg/μl,100ng/μl,10ng/μl,1ng/μl,100pg/μl,10pg/μl,1pg/μl),使用First-Strand cDNA Synthesis SuperMix(货号k1073)分别进行逆转录,然后取1μl cDNA,使用2X SYBR Green qPCR Master Mix(货号K1070)进行qPCR。
货号 | 产品名称 | 产品说明 |
K1070 | 2×SYBR Green qPCR Master Mix | 2X SYBR Green qPCR预混液 |
K1071 | Reverse Transcriptase | 热稳定的逆转录酶 |
K1072 | First-Strand cDNA Synthesis Kit | 高效的第一链cDNA合成试剂盒 |
K1073 | First-Strand cDNA Synthesis SuperMix | 用于第一链cDNA高效合成的逆转录反应预混液 |
K1074 | RT SuperMix for qPCR | 适用于两步法RT-qPCR的高效逆转录反应预混液 |
K1046 | RNase Inhibitor, Murine | Rnase抑制剂,保护RNA不被降解 |
K1040 | 2.5 mM dNTP Mixture | 2.5 mM dNTP预混液 |
K1041 | 10 mM dNTP Mixture | 10 mM dNTP预混液 |
K1042 | 25 mM dNTP Mixture | 25 mM dNTP预混液 |
四、mRNA体外转录合成平台
作为中国第一家能生产克级高纯度的mRNA公司,APExBIO拥有国内独家mRNA体外转录合成平台,自产用于合成的全套修饰核苷酸,转录酶,加尾酶等原材料。同时利用独特的mRNA纯化技术,可实现快速筛选多种mRNA修饰,以适应不同靶细胞和免疫原性筛选。
图1 新冠病毒mRNA疫苗开发的简要流程。基于mRNA体外转录合成平台,在体外合成表达病毒SARS-CoV-2蛋白N、M、E和S的mRNA,并将这些mRNA转入细胞,进行表达筛选,并通过蛋白自组装,成功获得了不含RNA内核的病毒样颗粒(virus like particle,VLP)。将mRNA疫苗递送到体内后,表达的病毒样颗粒可激活免疫系统,产生有效结合病毒的中和抗体。
图2 mRNA表达的病毒样颗粒(virus like particle,VLP)的电镜照片,清楚地显示了病毒外壳中由S蛋白构成的“皇冠”,这也正是病毒进行细胞侵袭的关键部分。
图3 研发人员还用mRNA在细胞中表达了S蛋白的RBD结构域。该结构域与人细胞受体蛋白ACE2直接相互作用,对病毒进入细胞起到关键作用。(b)新冠病毒S蛋白的RBD结构域。(c)不同修饰mRNA序列表达的抗原的蛋白质印迹分析。 左上:在HEK 293T细胞中表达的M蛋白; 左下:在Hela细胞中表达的M蛋白; 右上:在HEK 293T细胞中表达的全长S蛋白。 右下:在HEK 293T细胞中表达的分泌S-RBD。
图1-3均来自论文“Towards an effective mRNA vaccine against 2019-nCoV: demonstration of virus-like particles expressed from a modified mRNA cocktail”。
(1)mRNA体外转录试剂盒
(2)mRNA体外转录相关的修饰核苷酸
货号 | 产品名称 | 产品说明 |
B8174 | mCAP | 用于mRNA加帽,形成Cap 0结构,增加mRNA的稳定性,提高翻译效率。 |
B8175 | ARCA | |
B8178 | EZ Cap™ Reagent AG (3' OMe) | 用于mRNA的共转录加帽,以形成Cap 1结构,增加mRNA的稳定性,提高翻译效率。 |
B7972 | Pseudo-UTP(Ψ-UTP) | 增加mRNA的稳定性,降低宿主的免疫原性。 |
B7967 | 5-Methyl-CTP(5-mCTP) | |
B8061 | 5-Methoxy-UTP(5-moUTP) |
更多修饰核苷酸请点击:https://www.apexbio.cn/modified-nucleotides.html
(3)特定的mRNA:报告基因mRNA,基因编辑mRNA
货号 | 产品名称 | 产品说明 |
R1009 | ARCA Cy5 EGFP mRNA (5-moUTP) | 具备更好性能的5-moUTP修饰mRNA,带有Cy5标记,抑制RNA介导的先天免疫激活,具有稳定高效的表达效率,可进行定位以及实验对照。 |
R1007 | ARCA EGFP mRNA (5-moUTP) | 具备更好性能的5-moUTP修饰mRNA,抑制RNA介导的先天免疫激活,具有稳定高效的表达效率,可作为实验对照。 |
R1011 | EZ Cap™ Cy5 EGFP mRNA (5-moUTP) | 具有Cap 1结构的EGFP mRNA,使用5-moUTP和Cy5-utp修饰,提供更高的转录效率并抑制RNA介导的先天免疫激活。 |
R1018 | EZ Cap™ Firefly Luciferase mRNA | 具有Cap 1结构的萤火虫荧光素酶mRNA,提供更高的转录效率。 |
R1017 | EZ Cap™ mCherry mRNA (5mCTP, ψUTP) | 具有Cap 1结构的mCherry mRNA,使用5mCTP和ψUTP修饰,提供更高的转录效率并抑制RNA介导的先天免疫激活。 |
R1006 | SpCas9 mRNA (ARCA, 5mCTP, ψUTP) | 应用于基因编辑技术,和guideRNA协同对DNA进行定点切割。 |
了解更多请点击:https://www.apexbio.cn/rna.html
APExBIO长期为广大科研客户提供小分子药物。包括覆盖多种化合物的分子库,同时不断推出新型化合物。例如,核酸衍生物类的新型免疫佐剂,2,3-cGAMP,可特异性激活STING Pathway,刺激先天免疫,加速抗体产生。
最近,APExBIO还推出了一系列抗体药与疫苗开发相关产品。并与美国Boston Cellron(www.cellron.com)联合推出了促进B细胞培养试剂盒和B细胞培养必需的Feeder cell (3T3-msCD40L Cell Lines),助力单B细胞筛选中和抗体的技术。
(4)抗体药和疫苗相关产品
货号 | 产品名称 | 产品说明 |
A8791 | D-Lin-MC3-DMA | 一种有效、可电离的阳离子脂质体,用于体内递送siRNA,也可用于制备纳米颗粒递送mRNA药物等。 |
B8293 | ddhCTP | 全球独家,新型核酸类抗病毒小分子 |
B8362 | 2,3-cGAMP | 核酸衍生物类新型疫苗佐剂 |
BC1001 | Human B Cell Culture and Expansion Kit | 全球独家, 14天B细胞培养试剂盒 (适合96孔板,384孔板高通量B细胞筛选) |
BC1002 | 3T3-msCD40L Cell Lines | 全球独家,B细胞体外培养Feeder cell |