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RNA

mRNA定制合成服务

高得率,高性价比

APExBIO 提供高得率和高性价比的 mRNA 和长链RNA(多个碱基)的定制合成。在微克到毫克的级别上,开展广泛的mRNA修饰服务。mRNA 可从客户提供的 DNA 模板生成;或者我们可以从零开始, 提供完整的mRNA体外合成。我们为所有的标准 mRNA 片段进行 mCAP、ARCA 和 EZ Cap(等同于CleanCap)加帽或修饰核苷酸的处理。

有关订购和更多信息,请下载我们的客户mRNA定制合成问卷 (Custom mRNA Synthesis Questionnaire.PDF) 并通过电子邮件发送至 (sales@apexbio.cn)。我们将很快给您答复并提供报价。

Modified Nucleotide-containing mRNA Synthesis

mRNA体外转录合成(IVT, in vitro transcription)

为了mRNA能最终有效地在体外翻译, 需要在体外转录合成mRNA时,掺入5’端的m7G加帽结构和3’端的多聚腺苷酸[poly(A)尾]结构。加帽的过程,是通过T7 RNA 聚合酶共转录,在mRNA分子5’端掺入诸如ARCA (Anti-Reverse Cap Analog)。 加尾的过程,是用Poly(A)聚合酶在mRNA分子3’端,加上poly(A)尾, 再用DNase酶消化DNA模板。5-甲基-胞苷(5-Methyl-CTP), 假尿苷(Pseudo/ ψ-UTP)和其他修饰核苷酸也可掺入mRNA, 来降低免疫原性和加强稳定性。合成后的mRNA适用于细胞转染、微注射、体外翻译和RNA疫苗等。

定制合成 的mRNA 拥有广泛的应用:

  • --用于基因组编辑的mRNA,比如Zinc-finger Nuclease mRNA,TALEN mRNA,Cas9 mRNA和Recombinase mRNA等。
  • --报告基因的mRNA,比如EGFP mRNA和 Luc mRNA, 用于荧光显微镜、流细胞测量和生物发光成像等。
  • --重组mRNA, 用于non-integrating generation of iPSC。

产品验证:

相关产品
货号 产品名称 货号 产品名称
B8175 ARCA B8174 mCAP
B7972 Pseudo-UTP B7967 5-Methyl-CTP
B8061 5-Methoxy-UTP K1046 RNase Inhibitor, Murine
K1047 HyperScribe™ T7 High Yield RNA Synthesis Kit K1053 HyperScribe™ Poly (A) Tailing Kit
K1060 HyperScribe™ T7 High Yield Fluorescein RNA Labeling Kit K1061 HyperScribe™ T7 High Yield Cy3 RNA Labeling Kit
K1062 HyperScribe™ T7 High Yield Cy5 RNA Labeling Kit K1063 HyperScribe™ All in One mRNA Synthesis Kit (ARCA, T7, poly(A))
K1064 HyperScribe™ All in One mRNA Synthesis Kit Plus 1 (ARCA, 5mCTP, ψUTP, T7, poly(A)) K1065 HyperScribe™ All in One mRNA Synthesis Kit Plus 2 (ARCA, 5-moUTP, T7, poly(A))
K1066 HyperScribe™ All in One mRNA Synthesis Kit II (EZ Cap Reagent AG (3' OMe), T7, poly(A)) K1067 HyperScribe™ All in One mRNA Synthesis Kit II Plus 1 (EZ Cap Reagent AG (3' OMe), 5mCTP, ψUTP, T7, poly(A))
K1068 HyperScribe™ All in One mRNA Synthesis Kit II Plus 2 (EZ Cap Reagent AG (3' OMe), 5-moUTP, T7, poly(A)) B8176 EZ Cap™ Reagent AG
B8178 EZ Cap™ Reagent AG (3' OMe)

mRNA纯化:

由T7 RNA聚合酶在体外转录合成的mRNA,可能含有各种污染物:比如未反应完全的小分子底物、反应所需的蛋白酶,以及反应中产生的非特异性产物,如过短或过长或未完全加帽的mRNA等。 某些RNA序列甚至会诱导高水平的免疫原性。

APExBIO提供高效的纯化技术,可去除相关污染物,从而提高下游应用的处理效率。

硅胶膜纯化柱(Silica-gel Membrane Spin Column)

它是一种用于快速核酸纯化的固相萃取技术。mRNA可以在特定条件下,结合到硅凝胶膜的固相,并在水中或TE (pH 7)中进行后续洗涤和洗脱步骤。这种方法清除了大多数蛋白质、DNA和NTPs。

HPLC纯化法(ÄKTA avant系统):

mRNA的纯化,可以通过ÄKTA avant系统,使用alkylated non-porous polystyrene-divinylbenzene copolymer microspheres和优化的缓冲体系,然后进行mRNA分析和mRNA分离。

HPLC 纯化法可以从体外合成和化学修饰后的mRNA 中,去除双链DNA和其他污染物,使 mRNA 具有更高水平的翻译,减少免疫原性或 RNA sensor激活。

我们所有的 mRNA 产品都提供:

  • -将mCAP/ARCA/EZ Cap掺入到转录合成的mRNA片段中,以提高翻译效率。
  • -通过加入经过修饰的核苷酸(5mCTP, ψUTP)和poly(A)尾,减少宿主细胞免疫反应并增强稳定性。
  • -在合成mRNA过程中,加入DNase酶,降解DNA模板。
  • -用磷酸酶去除RNA末端的5'三磷酸盐(5’ triphosphates),进一步减少哺乳动物细胞的先天免疫反应。
  • -采用强大的纯化系统,提供高产量的 mRNA来适应大多数下游应用。

产品验证:

相关产品
货号 产品名称 货号 产品名称
R1001 ARCA EGFP mRNA R1002 ARCA EGFP mRNA (5mCTP, ψUTP)
R1003 mCAP EGFP mRNA R1004 mCAP EGFP mRNA (5mCTP, ψUTP)
R1005 Firefly Luciferase mRNA (ARCA, 5mCTP, ψUTP) R1006 SpCas9 mRNA (ARCA, 5mCTP, ψUTP)
R1007 ARCA EGFP mRNA (5-moUTP) R1008 ARCA Cy3 EGFP mRNA (5-moUTP)
R1009 ARCA Cy5 EGFP mRNA (5-moUTP) R1010 EZ Cap™ Cy5 Firefly Luciferase mRNA (5-moUTP)
R1011 EZ Cap™ Cy5 EGFP mRNA (5-moUTP) R1012 Firefly Luciferase mRNA (ARCA, 5-moUTP)
R1013 EZ Cap™ Firefly Luciferase mRNA (5-moUTP) R1014 ARCA Cas9 5-moUTP
R1015 EZ Cap™ Cas9 5-moUTP R1016 EZ Cap™ EGFP mRNA (5-moUTP)
R1017 EZ Cap™ mCherry mRNA (5mCTP, ψUTP) R1018 EZ Cap™ Firefly Luciferase mRNA