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RNA

mRNA定制合成服务

高得率,高性价比

APExBIO 提供高得率和高性价比的 mRNA 和长链RNA(多个碱基)的定制合成。在微克到毫克的级别上,开展广泛的mRNA修饰服务。mRNA 可从客户提供的 DNA 模板生成;或者我们可以从零开始, 提供完整的mRNA体外合成。我们为所有的标准 mRNA 片段进行 mCAP、ARCA 和 EZ Cap加帽或修饰核苷酸的处理。

有关订购和更多信息,请下载我们的客户mRNA定制合成问卷 (Custom mRNA Synthesis Questionnaire.PDF) 并通过电子邮件发送至 (sales@apexbio.cn)。我们将很快给您答复并提供报价。

Modified Nucleotide-containing mRNA Synthesis

mRNA体外转录合成(IVT, in vitro transcription)

为了mRNA能最终有效地在体外翻译, 需要在体外转录合成mRNA时,掺入5’端的m7G加帽结构和3’端的多聚腺苷酸[poly(A)尾]结构。加帽的过程,是通过T7 RNA 聚合酶共转录,在mRNA分子5’端掺入诸如ARCA (Anti-Reverse Cap Analog)。 加尾的过程,是用Poly(A)聚合酶在mRNA分子3’端,加上poly(A)尾, 再用DNase酶消化DNA模板。5-甲基-胞苷(5-Methyl-CTP), 假尿苷(Pseudo/ ψ-UTP)和其他修饰核苷酸也可掺入mRNA, 来降低免疫原性和加强稳定性。合成后的mRNA适用于细胞转染、微注射、体外翻译和RNA疫苗等。

定制合成 的mRNA 拥有广泛的应用:

  • --用于基因组编辑的mRNA,比如Zinc-finger Nuclease mRNA,TALEN mRNA,Cas9 mRNA和Recombinase mRNA等。
  • --报告基因的mRNA,比如EGFP mRNA和 Luc mRNA, 用于荧光显微镜、流细胞测量和生物发光成像等。
  • --重组mRNA, 用于non-integrating generation of iPSC。

产品验证:

相关产品
货号 产品名称 货号 产品名称
B8175 ARCA B8174 mCAP
B7972 Pseudo-UTP B7967 5-Methyl-CTP
B8061 5-Methoxy-UTP K1046 RNase Inhibitor, Murine
K1047 HyperScribe™ T7 High Yield RNA Synthesis Kit K1053 HyperScribe™ Poly (A) Tailing Kit
K1060 HyperScribe™ T7 High Yield Fluorescein RNA Labeling Kit K1061 HyperScribe™ T7 High Yield Cy3 RNA Labeling Kit
K1062 HyperScribe™ T7 High Yield Cy5 RNA Labeling Kit K1063 HyperScribe™ All in One mRNA Synthesis Kit (ARCA, T7, poly(A))
K1064 HyperScribe™ All in One mRNA Synthesis Kit Plus 1 (ARCA, 5mCTP, ψUTP, T7, poly(A)) K1065 HyperScribe™ All in One mRNA Synthesis Kit Plus 2 (ARCA, 5-moUTP, T7, poly(A))
K1066 HyperScribe™ All in One mRNA Synthesis Kit II (EZ Cap Reagent AG (3' OMe), T7, poly(A)) K1067 HyperScribe™ All in One mRNA Synthesis Kit II Plus 1 (EZ Cap Reagent AG (3' OMe), 5mCTP, ψUTP, T7, poly(A))
K1068 HyperScribe™ All in One mRNA Synthesis Kit II Plus 2 (EZ Cap Reagent AG (3' OMe), 5-moUTP, T7, poly(A)) B8176 EZ Cap™ Reagent AG
B8178 EZ Cap™ Reagent AG (3' OMe)

mRNA纯化:

由T7 RNA聚合酶在体外转录合成的mRNA,可能含有各种污染物:比如未反应完全的小分子底物、反应所需的蛋白酶,以及反应中产生的非特异性产物,如过短或过长或未完全加帽的mRNA等。 某些RNA序列甚至会诱导高水平的免疫原性。

APExBIO提供高效的纯化技术,可去除相关污染物,从而提高下游应用的处理效率。

硅胶膜纯化柱(Silica-gel Membrane Spin Column)

它是一种用于快速核酸纯化的固相萃取技术。mRNA可以在特定条件下,结合到硅凝胶膜的固相,并在水中或TE (pH 7)中进行后续洗涤和洗脱步骤。这种方法清除了大多数蛋白质、DNA和NTPs。

HPLC纯化法(ÄKTA avant系统):

mRNA的纯化,可以通过ÄKTA avant系统,使用alkylated non-porous polystyrene-divinylbenzene copolymer microspheres和优化的缓冲体系,然后进行mRNA分析和mRNA分离。

HPLC 纯化法可以从体外合成和化学修饰后的mRNA 中,去除双链DNA和其他污染物,使 mRNA 具有更高水平的翻译,减少免疫原性或 RNA sensor激活。

我们所有的 mRNA 产品都提供:

  • -将mCAP/ARCA/EZ Cap掺入到转录合成的mRNA片段中,以提高翻译效率。
  • -通过加入经过修饰的核苷酸(5mCTP, ψUTP)和poly(A)尾,减少宿主细胞免疫反应并增强稳定性。
  • -在合成mRNA过程中,加入DNase酶,降解DNA模板。
  • -用磷酸酶去除RNA末端的5'三磷酸盐(5’ triphosphates),进一步减少哺乳动物细胞的先天免疫反应。
  • -采用强大的纯化系统,提供高产量的 mRNA来适应大多数下游应用。

产品验证:

相关产品
货号 产品名称 货号 产品名称
R1001 ARCA EGFP mRNA R1005 Firefly Luciferase mRNA (ARCA, 5mCTP, ψUTP)
R1006 SpCas9 mRNA (ARCA, 5mCTP, ψUTP) R1007 ARCA EGFP mRNA (5-moUTP)
R1008 ARCA Cy3 EGFP mRNA (5-moUTP) R1009 ARCA Cy5 EGFP mRNA (5-moUTP)
R1010 EZ Cap™ Cy5 Firefly Luciferase mRNA (5-moUTP) R1011 EZ Cap™ Cy5 EGFP mRNA (5-moUTP)
R1012 Firefly Luciferase mRNA (ARCA, 5-moUTP) R1013 EZ Cap™ Firefly Luciferase mRNA (5-moUTP)
R1015 EZ Cap™ Cas9 mRNA (5-moUTP) R1016 EZ Cap™ EGFP mRNA (5-moUTP)
R1017 EZ Cap™ mCherry mRNA (5mCTP, ψUTP) R1018 EZ Cap™ Firefly Luciferase mRNA
R1019 EZ Cap™ Firefly Luciferase mRNA (5-moUTP) coated with LNP R1020 EZ Cap™ EPO mRNA (ψUTP)