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ARCA EGFP mRNA

 
Catalog No.
R1001
用ARCA修饰的增强型绿色荧光蛋白的mRNA,具有稳定高效的表达效率,可作为实验对照。
组合的产品项目
规格价格库存 数量
100ug (1mg/mL)
¥ 2,083.00
现货
1mg (1mg/mL)
¥ 11,250.00
现货
5x1mg (1mg/mL)
¥ 40,500.00
现货

电话: 021-55669583

邮箱: sales@apexbio.cn

全球经销商

B

背景

ARCA EGFP mRNA是一种报告(reporter)mRNA,可以用作对照,通过各种基于荧光的方法研究哺乳动物细胞中的转染和表达。

将ARCA EGFP mRNA转染到细胞后,细胞可表达EGFP(增强型绿色荧光蛋白)。EGFP蛋白是一种常见的报告分子,激发时会发出强烈且明亮的绿色荧光,其最大激发/发射光波长分别为488 nm /509 nm。

该产品已经是5’端加帽和3’端加poly(A)尾的mRNA,可以模拟真核生物中加工成熟的mRNA。使用ARCA(抗反向帽类似物,货号B8175)以共转录的方式对mRNA进行了加帽,使其具有Cap 0结构,增加了mRNA的稳定性和翻译效率[1,2]。Poly(A)尾的添加使mRNA更加稳定并提高mRNA的翻译起始效率[3]。

mRNA转染的优点:
· 无需核吸收——蛋白直接在细胞质中表达
· 其蛋白质表达比DNA转染更快
· 以完全不依赖启动子的方式表达蛋白质
· 没有基因组整合的风险
· 非常适合转染生长缓慢或不分裂的细胞
· 蛋白表达与mRNA的量直接相关
· 瞬时转染:蛋白质的表达在有限的时间内持续,避免了与积累有关的毒性

References:
[1] Stepinski J, Waddell C, Stolarski R, et al. Synthesis and properties of mRNAs containing the novel "anti-reverse" cap analogs 7-methyl(3'-O-methyl)GpppG and 7-methyl (3'-deoxy)GpppG. RNA. 2001;7(10):1486–1495.
[2] Jemielity J, Fowler T, Zuberek J, et al. Novel "anti-reverse" cap analogs with superior translational properties. RNA. 2003;9(9):1108–1122.
[3] Gallie DR, Tanguay R. Poly(A) binds to initiation factors and increases cap-dependent translation in vitro. J Biol Chem. 1994;269(25):17166–17173.

文献引用

质量控制

Identity & Purity

批次:

相关生物数据

ARCA EGFP mRNA
 

Description

mRNA Length 996 nucleotides
Concentration1 mg/mL
Buffer 1 mM Sodium Citrate, pH 6.4 Storage -40°C or below
General tips请将其于冰上溶解,并小心防止RNase污染降解。 尽可能避免反复冻融。 不要涡旋震荡。 首次使用时,将其轻柔离心并分成几份,可供单独使用。 使用不含RNase的试剂和耗材,使用适当的无RNase技术。 直至与转染试剂混合,才可加入含有血清的培养基中。
Shipping Condition试用装:干冰运输。

试验操作

细胞系 HEK293T
细胞培养板 48孔板
铺板细胞量 5w左右
转染前细胞密度 细胞融合度50%-60%
转染条件 培养17h后在无血清无抗生素的培养基中进行转染(1μg mRNA+2μL lipofectamine 2000),4h后更改为完全培养基恢复至正常生长环境,24h后进行荧光拍摄
RNA转染量和转染试剂 1μg mRNA与2μL lipofectamine 2000按照说明书制备
转染效果 转染效率90%以上