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Leupeptin, Microbial

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Catalog No.
A2570
丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶抑制剂
组合的产品项目
规格价格库存 数量
25mg
¥ 1,000.00
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Background

Leupeptin is a reversible inhibitor of protease with Ki values of 35 nM, 3.4 μM, 6 nM and 72 nM for bovine trypsin, human plasmin, bovine spleen cathepsin B and recombinant human calpain, respectively [1, 2].

As a protease inhibitor, leupeptin was originally isolated from the Streptomyces species. It exerted poor membrane permeability due to its polar C-terminal. For calpain, leupeptin showed moderate potent activities with IC50 values of 0.211 μM, 1.8 μM and 0.938 μM against the enzymes isolated from porcine erythrocyte, porcine kidney and human platelet, respectively. In cultured MRC-C cells, leupeptin suppressed the growth of human coronavirus strain 229E through inhibited the activity of trypsin. The mean IC50 value was 0.8 μM [2, 3].

References:
1.  Mehdi S. Cell-penetrating inhibitors of calpain. Trends in biochemical sciences, 1991, 16: 150-153.
2.  Krauser J A, Powers J C. 6.1 BIOLOGICAL ROLES. Proteinase and Peptidase Inhibition: Recent Potential Targets for Drug Development, 2003: 144.
3.  Appleyard G, Tisdale M. Inhibition of the growth of human coronavirus 229E by leupeptin. Journal of general virology, 1985, 66(2): 363-366.

Chemical Properties

StorageStore at -20°C
该产品在溶液中不稳定,建议现配现用
M.Wt475.59
Cas No.103476-89-7
FormulaC20H38N6O4.1/2H2SO4
SynonymsLeupeptin hemisulfate salt microbial,L-Leucinamide,Leupeptin, Microbial
Solubility≥24.7mg/mL in DMSO
Chemical Name2-acetamido-N-(1-((5-((diaminomethylene)amino)-1-oxopentan-2-yl)amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl)-4-methylpentanamide
SDFDownload SDF
Canonical SMILESO=C(C(C([H])([H])C(C([H])([H])[H])([H])C([H])([H])[H])([H])N([H])C(C([H])([H])[H])=O)N([H])C(C(N([H])C(C([H])=O)([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])/N=C(N([H])[H])/N([H])[H])=O)([H])C([H])([H])C(C([H])([H])[H])([H])C([H])([H])[H]
运输条件试用装:蓝冰运输。 其他可选规格:常温运输或根据您的要求用蓝冰运输。
一般建议为了使其更好的溶解,请用37℃加热试管并在超声波水浴中震动片刻。不同厂家不同批次产品溶解度各有差异,仅做参考。若实验所需浓度过大至产品溶解极限,请添加助溶剂助溶或自行调整浓度。

试验操作

细胞实验 [1]:

细胞系

感染了HCV 229E的MRC-C细胞

制备方法

在DMSO中的溶解度≥49.35mg/mL。若配制更高浓度的溶液,一般步骤如下:请将试管置于37℃加热10分钟和/或将其置于超声波浴中震荡一段时间。原液于-20℃可放置数月。

反应条件

0, 1, 10和100 μg/mL;24小时

实验结果

在MRC-C细胞培养液中,Leupeptin抑制人冠状病毒229E复制。空斑实验表明,Leupeptin的IC50值为0.4 μg/mL。当Leupeptin剂量为50 μg/mL时,宿主细胞生长不受影响。在病毒单周期生长实验中,于感染后2小时内加入Leupeptin(100 μg/mL)才能抑制病毒增殖,上述结果表明其作用于病毒复制的早期阶段。

动物实验 [2]:

动物模型

C57BL/6NCrl雄性小鼠

给药剂量

0, 9, 18 36和40 mg/kg;腹腔注射

实验结果

小鼠对Leupeptin的耐受性良好。在总组织提取物和溶酶体富集部分(LE部分)中,Leupeptin呈剂量依赖性地大量增加LC3b-II。在电子显微镜(EM)的水平下,Leupeptin诱导电子致密囊泡结构(在肝细胞中,给予40 mg/kg Leupeptin,于60分钟后,可以显示上述结构)堆积。结果表明,Leupeptin使LC3b-II免受溶酶体降解,从而提升LC3b-II的体内水平。因此,基于Leupeptin的测试有望用于研究小鼠巨自噬动态平衡。

其他注意事项

请于室内测试所有化合物的溶解度。虽然化合物的实际溶解度可能与其理论值略有不同,但仍处于实验系统误差的允许范围内。

References:

[1]. Appleyard G, Tisdale M. Inhibition of the growth of human coronavirus 229E by leupeptin. Journal of general virology, 1985, 66(2): 363-366.

[2]. Haspel J, Shaik RS, Ifedigbo E, Nakahira K, Dolinay T, Englert JA, Choi AM. Characterization of macroautophagic flux in vivo using a leupeptin-based assay. Autophagy. 2011 Jun;7(6):629-42.

生物活性

描述 Leupeptin, Microbial(Leupeptin hemisulfate)是一种可逆的和竞争性的蛋白酶抑制剂,作用于胰蛋白酶(trypsin)和组织蛋白酶B(cathepsin B),Ki值分别为0.13 nM和7 nM。
靶点 Trypsin Cathepsin B        
IC50 0.13 nM (Ki) 7 nM (Ki)        

质量控制