Z-VDVAD-FMK

Z-VDVAD-FMK（CAS号：210344-92-6）是一种不可逆的细胞渗透性抑制剂，主要靶向半胱天冬酶-2（caspase-2），同时对caspase-3和caspase-7也具有额外抑制活性。它通过与半胱天冬酶活性位点的半胱氨酸共价结合发挥作用，进而阻断其蛋白水解活性并干扰下游凋亡信号通路[3]。

功能研究已证实caspase-2在凋亡调控中的关键作用。在Jurkat T淋巴细胞中，使用Z-VDVAD-FMK处理或用前体caspase-2反义核酸（Casp-2/AS）稳定转染，均能使细胞对依托泊苷（etoposide）诱导的细胞色素c释放产生抗性，这表明caspase-2在线粒体通透性改变的上游发挥作用[1]。与之一致的是，无论是通过Z-VDVAD-FMK还是Casp-2/AS抑制前体caspase-2的激活，都能在依托泊苷诱导的细胞死亡过程中，减弱细胞色素c的释放及其他凋亡特征。

类似地，在牛脑微血管内皮细胞中，暴露于氧合血红蛋白（OxyHb）会显著提高caspase-2和caspase-3的活性，从而引发凋亡。联合使用caspase-2抑制剂Z-VDVAD-FMK或caspase-3抑制剂Z-DEVD-FMK，能显著减少细胞脱落、半胱天冬酶活性、DNA片段化及多聚ADP核糖聚合酶（PARP）切割，这表明caspase-2和caspase-3都是OxyHb诱导凋亡的关键介导因子[2]。

此外，具有最短序列的caspase-2抑制剂Z-VDVAD-FMK（同时也抑制caspase-3和caspase-7）已被证实可阻止阿霉素（doxorubicin）诱导的细胞核凋亡，但无法完全阻断细胞死亡，这提示不依赖半胱天冬酶的机制也可能参与细胞毒性作用[4]。

References:

Robertson, J. D., Enoksson, M. et al. Caspase-2 Acts Upstream of Mitochondria to Promote Cytochrome c Release during Etoposide-induced Apoptosis. J. Biol. Chem. 277: 29803–29809 (2002).

Meguro, T., Chen, B. et al. Caspase Inhibitors Attenuate Oxyhemoglobin-Induced Apoptosis in Endothelial Cells. Stroke 32: 561–566 (2001).

Talanian, R. V. et al. Substrate Specificity of Caspase Family Proteases. J. Biol. Chem. 272: 9677–9682 (1997).

Gamen, S. et al. Doxorubicin Treatment Activates a Z-VAD-Sensitive Caspase, Which Causes Δψm Loss, Caspase-9 Activity, and Apoptosis in Jurkat Cells. Exp. Cell Res. 258: 223 (2000).