BCECF-AM是最常用的检测细胞内pH的荧光探针。BCECF-AM是乙酰甲酯化的BCECF。BCECF具有很好的水溶性，但是很难穿过细胞膜进入到细胞内。

BCECF-AM是一种可以穿透细胞膜的荧光染料。BCECF-AM能够轻易地进入到细胞内，只需要通过孵育就能进入细胞。BCECF-AM本身没有荧光，进入细胞后可以被细胞内的酯酶剪切形成BCECF，从而被滞留在细胞内。它可以和Fura 2一样用比率法测定。一般使用两种激发光激发（490 nm和450 nm），在530 nm检测发射光。两种激发对应的发射荧光比率与pH有很好的线性关系。双重使用fura-2 AM和BCECF/AM，可以同时测量Ca2 + 浓度和pH的变化[1]。

BCECF AM广泛用于哺乳动物细胞的研究，也可用于动物组织、植物细胞、细菌和酵母等细胞内pH水平检测。细胞内pH在调节细胞功能方面起重要作用，包括生长、钙调节、酶活性、受体介导的信号转导、离子转运、内吞作用、趋化作用、粘附以及其他细胞过程。

BCECF-AM对潮湿非常敏感。所以要小心保存。如果DMSO储存液的颜色从浅黄色变为深橙色就代表了AM的分解。所以，通过对颜色变化的观测，能判断AM酯的水解情况。

References：

[1] Miyata H, Hayashi H, Suzuki S, et al. Dual loading of the fluorescent indicator fura-2 and 2,7-biscarboxyethyl-5(6)-carboxyfluorescein (BCECF) in isolated myocytes. Biochem Biophys Res Commun. 1989;163(1):500–505.