Proteinase K

蛋白酶K是一种广谱性丝氨酸蛋白酶，我们的产品来源于编码共附生白色侧齿霉菌内切蛋白酶的基因重组毕赤酵母菌株。它是一种高活性的蛋白酶，常用于水解各种蛋白质和酶（包括核酸内切酶，核酸外切酶，DNA酶或RNA酶）。因此，蛋白酶K常用于DNA制备且不损害其完整性。蛋白酶K优先水解邻近疏水性氨基酸（脂肪族，芳香族等）的羧基端的肽键，蛋白酶K含有不同的pH值，缓冲液，去垢剂（如SDS），螯合剂（如EDTA）和温度等因素的条件下仍具有优异的性能。

除了基因组的分离之外，它还可以检测酶的定位或从DNA中去除酶以提高克隆效率。

蛋白酶K的合适工作浓度通常在0.05-1mg / mL的范围内。酶的活性可被0.2-1％SDS或1- 4mol尿素刺激。蛋白酶K可以被钙离子（1-5 mM）激活，尽管钙离子不影响酶的活性，但它有助于酶的热稳定性并保护蛋白酶免于自溶。蛋白酶K有两个Ca2+结合位点，位于活性中心附近。钙离子对蛋白酶K的底物结合位点具有调节功能，但不直接参与催化机制。蛋白酶K会被DIFP或PMSF灭活。不被EDTA，碘乙酸，胰蛋白酶特异性抑制剂TLCK，胰凝乳蛋白酶特异性抑制剂TPCK和对氯苯甲酸（p-chloromercuribenzoate）抑制。

建议工作的最佳pH值为7.5-8.0，最适温度为50-55°C。温度高于65°C时蛋白酶K会发生快速变性。您可以在95°C下作用10分钟使其热灭活。

References:

[1]. Kraus, E; et.al. Proteinase K from the Mold Tritirachium album limber, Specificity and Mode of Action. Z. Physiol. Chem., 357:939; 1976.

[2]. Jany,KD, et al. Amino Acid Sequence of Proteinase K from the Mold, Tritirachium albumlimber. Proteinase K; a Subtilisin-related Enzyme with Disulfide Bonds. FEBS Letter, 199,139.1986.