Coelenterazine h

Coelenterazine h（腔肠素h），是天然腔肠素（Coelenterazine）的去羟基衍生物，是多种荧光素酶包括海肾荧光素酶（Renilla luciferase）、分泌型Gaussia荧光素酶和薮枝虫荧光素酶（Obelia luciferase）等的作用底物，也是脱辅基水母发光蛋白（apoeaquorin）的辅因子。腔肠素h通常用于生物发光钙检测以及BRET（生物发光共振能量转移），ELISA和HTS方法中的报告基因监测，以及化学发光检测细胞或组织中的超氧阴离子和过氧亚硝酸盐。

荧光素酶通常用作转录调控的报告基因，而脱辅基水母发光蛋白通常用作钙指示剂。

生物发光现象是荧光素酶催化特定底物氧化时产生的可见光的发射。荧光素酶的底物可大致分为两类，萤光素和腔肠素。荧光素酶已广泛用作报告蛋白和生物发光共振能量转移（BRET）中的生物发光供体，以研究蛋白质之间的相互作用。当腔肠素h与荧光素酶、氧和钙离子结合时，腔肠素h被氧化，产生蓝色光，波长在465-493 nm之间。这使得腔肠素h可用作荧光素酶，氧气或钙的检测试剂。腔肠素h可与Gaussia，Renilla，Obelia荧光素酶一起使用，不应与萤火虫（firefly）荧光素酶或海萤（Vargula）荧光素酶一起使用。使用萤光素或衍生物作为底物的荧光素酶（例如萤火虫）需要ATP和Mg2 +作为辅助因子，并显示出稳定的“发光”动力学，发出的光通常在可见光谱的绿黄色区域中。相反，使用腔肠素h的荧光素酶不需要ATP，并产生快速的，通常是强烈的“闪光灯”光。

腔肠素h与脱辅基水母发光蛋白（apoeaquorin）结合形成水母发光蛋白（aequorin），后者与钙结合后发蓝色光，其发光强度比天然腔肠素高10-20倍。水母发光蛋白对钙离子敏感，可用于测量广泛范围的钙浓度（从〜0.1 μM到> 100 μM），为钙离子浓度的微小变化提供了有用的指示[1]。

[1] Shimomura, O., Kishi, Y., Inouye, S . The relative rate of aequorin regeneration from apoaequorin and coelenterazine analogues. Biochemistry Journal 296(Pt 3), 549-551 (1993).）