Rhod-2 AM是一种可渗透细胞的、可用可见光激发的高亲和力 Ca²⁺ 指示剂。Rhod-2 AM本身不结合Ca²⁺，一旦进入细胞，就会被细胞内的内源性酯酶水解成Rhod-2。Rhod-2与Ca²⁺具有很高的亲和力，结合Ca²⁺后荧光增加近100倍，其激发和发射最大值分别为557 nm和581 nm，激发和发射光谱不会随着Ca²⁺浓度变化发生明显迁移，适合与氩和氪激光光源一起使用。与其他可见光激发荧光探针如Fluo-3/4相比，Rhod-2具有长波长，更适用于检测自发荧光水平高的细胞和组织中的Ca²⁺水平，还用于检测由光感受器和可光活化钙离子螯合剂产生的Ca²⁺释放。

Rhod-2适用于通过共聚焦激光扫描显微镜和流式细胞术监测细胞内的钙离子。Rhod-2与钙的解离常数（Kd = 1.0 mM）是所有荧光钙探针中最高的，为监测钙浓度提供了更大的范围。Rhod-2可准确测量线粒体内Ca²⁺的流入和流出[1,2]。

References:

[1] Maxwell JT, Tsai CH, Mohiuddin TA, et al. Analyses of Mitochondrial Calcium Influx in Isolated Mitochondria and Cultured Cells. J Vis Exp. 2018;(134):57225. Published 2018 Apr 27.

[2] Fonteriz RI, de la Fuente S, Moreno A, et al. Monitoring mitochondrial [Ca(2+)] dynamics with rhod-2, ratiometric pericam and aequorin. Cell Calcium. 2010;48(1):61–69.