Double-stranded RNA (dsRNA) ELISA Kit

dsRNA是mRNA在体外转录过程中产生的一种副产物，具有较强的免疫原性，易诱导机体产生免疫反应，从而降低mRNA类生物制品的疗效。因此，dsRNA被视为一种工艺杂质，需要在生产过程中予以去除，并严格控制其残留量。

本试剂盒采用双抗体夹心法原理，并结合生物素-链霉亲和素（Biotin-Streptavidin, B-SA）放大检测系统，专用于定量检测样本中长度为60 bp及以上的双链RNA（dsRNA）含量。该检测方法与dsRNA的具体核酸序列无关。检测过程为：首先在酶标板微孔中预包被抗dsRNA捕获抗体，加入待测样本后进行孵育，使样本中的dsRNA与捕获抗体特异性结合。洗涤去除未结合物质后，再加入生物素标记的检测抗体进行孵育，形成“捕获抗体-dsRNA-检测抗体”的夹心复合物。再次洗涤后，加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的链霉亲和素（Streptavidin, SA），通过生物素-链霉亲和素的高亲和力结合实现信号放大。经过彻底洗涤后，加入底物TMB进行显色反应，TMB在HRP催化作用下呈现蓝色，经酸性终止液终止反应后转变为黄色。颜色的深浅与样本中dsRNA的含量呈正相关。最后，使用酶标仪在450 nm波长下测定各孔的吸光度（OD值），并根据标准曲线计算样本中dsRNA的浓度。

本试剂盒具有较高的灵敏度和简便的操作流程，可广泛应用于生物制品纯化工艺的优化、中间工艺过程中的dsRNA杂质控制，以及最终产品的放行检测。