Catalog No. K1053

HyperScribe™ Poly (A) Tailing Kit

Name: HyperScribe™ Poly (A) Tailing Kit, Poly(A)聚合酶加尾试剂盒
Brand: APExBIO
SKU: K1053
Price: 1600 CNY
Availability: InStock

（别名：Poly(A)聚合酶加尾试剂盒）

对RNA转录本添加poly (A)尾的试剂盒。可以和RNA体外转录试剂盒（如K1047）联用。

规格	价格	货期	数量
25rxns	￥1600.00	现货

仅用于科研，不用于诊疗。未经明确授权不得转售。

021-55669583sales@apexbio.cnAPExBIO

特色产品

Annexin V-FITC/PI Apoptosis Kit

用于双染检测细胞凋亡和坏死

- 在10-20分钟内完成染色
- 适用于流式细胞仪和荧光显微镜检测
- 准确区分活细胞/凋亡细胞/坏死细胞

Phos binding reagent (Phosbind) acrylamide

分离和检测磷酸化/非磷酸化蛋白

- 新型的磷酸盐结合标签和功能分子
- 用于免疫印迹和质谱分析等后续操作
- 适用于30 KDa-130 KDa大小的蛋白

Cell Counting Kit-8 (CCK-8)

用于细胞增殖和细胞毒性试验

- 比MTT，MTS或WST-1更敏感
- 对细胞无毒性
- 步骤更简单，无需有机溶剂

Cy5 TSA Fluorescence System Kit

Cy5荧光标记的酪胺信号放大系统

- 检测ICC/IHC/ISH中的低丰度靶点
- 可将信号灵敏度提高100倍
- 同时保持稳定的特异性和分辨率

EZ Cap™ Cy5 Firefly Luciferase mRNA (5-moUTP)

用于观察mRNA运送，定位，翻译

- 具有Cap1结构的荧光素酶mRNA
- 提供更高的转录效率并抑制免疫激活
- 使用5-moUTP和Cy5-utp修饰

HotStart™ 2X Green qPCR Master Mix

用于荧光定量目标DNA或cDNA

- 通过热启动机制优化扩增特异性
- 优异的扩增效率、可重复性和稳定性
- 卓越的灵敏度和准确性，操作简单

HyperScribe™ T7 High Yield Cy5 RNA Labeling Kit Plus

高效的Cy5修饰RNA转录试剂盒

- 适合原位/Northernblot杂交实验
- 优化的缓冲液和T7 RNA聚合酶混合物
- 20 μL反应体系可获得更高的RNA产量

产品描述产品性质产品组分生物相关数据操作说明常见问题产品引用文献摩尔浓度计算器

产品描述

HyperScribe™ Poly（A）Tailing Kit 使用大肠杆菌Poly（A）聚合酶（E-PAP）进行RNA体外转录的多聚腺苷酸化，转录产物至少添加150个核苷酸poly（A）尾部。聚腺苷酸化在真核生物增加RNA的稳定性中起重要作用，并可提高翻译起始效率。加帽和加尾后的mRNA与未修饰的mRNA相比，在显微注射和转染实验中其稳定性和翻译效率显著提高。

产品性质

产品有效期	2年
运输条件	干冰
注意事项	操作过程请严格保证无RNA酶和DNA酶污染。

产品组分

组分	组分货号	组分规格	保存条件
ATP Solution (100 mM)	K1043	100uL	-20°C
Nuclease-free Water	S0223	2x1mL	-20°C
E-PAP (2 units/uL)	S0255	100uL	-20°C
5X E-PAP Buffer	S0256	600uL	-20°C
25 mM MnCl2	S0257	250uL	-20°C
运输条件:干冰产品有效期:2年

生物相关数据

操作说明

Protocol

常见问题

Q1： 阳性对照反应

用HyperScribe^TM T7 High Yield RNA Synthesis Kit试剂盒转录2μL EGFP对照组模板，不要在转录反应中加入放射性标记的UTP示踪剂。
按照T7 RNA合成试剂盒的中的方法，用DNase I处理转录本。
根据第3部分的方法给转录本加poly(A)尾，但额外加入[α-³²P] ATP（任何特异性都可以用）；通过跟踪放射性标签，可以更容易地检测出在终反应中有多少ATP结合到poly(A)尾中；记得在向反应混合液加入E-PAP之前吸取留样，作为无酶反应体系（阴性对照）。
通过TCA沉淀法检测结合的带标记的RNA。（成功的加尾反应结合至少50%的放射性标签）
取0.5μl的阳性对照反应液及相应的无酶反应液进行电泳（用2.5%的甲醛-琼脂糖凝胶），同时用RNA markers。加poly(A)尾的产物其电泳条带应该比无酶反应产物的条带大至少150碱基。

Q2： 凝胶中无RNA可见

转录反应的问题：参考T7 RNA合成试剂盒（HyperScribe^TM T7 High Yield RNA Synthesis Kit）方法的注意事项。
RNase污染：用RNaseZap® Solution处理所有设备及凝胶盒等，并用RNase-free的管子和试剂。

Q3： 加尾反应后的产物RNA与未加尾的没有可见的大小区别（在凝胶中）

通过阳性对照反应检查试剂盒的组分：验证阳性对照反应结合了至少50%的放射性标记的ATP。
如果阳性对照没问题，但实验组的转录本出现问题：
- 凝胶分辨率不足：如果实验组转录本有几Kb大小，琼脂糖凝胶的分辨率可能不足以分辨尺寸的变化。用标签示踪法检测反应（见下部分）。
- 标签示踪法：如果阳性对照反应的产物比无酶反应产物更大，但实验组不是这样，那么就在加尾反应体系中加入示踪标记，通过TCA沉淀法测量结合的标记。如果结合的标记少于50%，但放射性标签的掺入大于背景，增加酶的用量或ATP的浓度可能实现理想长度poly(A)加尾的生成。

APExBIO 顾客使用本产品发表的 9 篇科研文献

1. Yijia Li, Jiaying Jin, et al. "Engineered exosome-lymphotropic mRNA vaccine encoding series-connected antigens elicits potent antitumor immunity in pancreatic cancer." Int J Pharm. 2026 Aug 21:703:127327. PMID: 42628816

2. Y -W Zhang, X -G Zhang, et al. "A homozygous variant in HFM1 causes preimplantation embryo developmental arrest by disrupting zygotic genome activation." Hum Reprod. 2025 Dec 22:deaf238. PMID: 41423819

3. Wenjing Wang, Xiang Yu, et al. "Codelivery of NGFR100W and VEGFA mRNA Enhances Vascular and Neural Repair in Diabetic Peripheral Neuropathy." Diabetes. 2025 Aug 1;74(8):1427-1440. PMID: 40435284

4. Wang Jiahui, Yu Xiang, et al. "The mitochondrial DNAJC co-chaperone TCAIM reduces α-ketoglutarate dehydrogenase protein levels to regulate metabolism." Molecular Cell Volume 85, Issue 3P638-651.E9, February 06, 2025. PMID: 39889707

5. Min Emma Huang, Yining Qin, et al. "C-to-G editing generates double-strand breaks causing deletion, transversion and translocation." Nat Cell Biol. 2024 Feb;26(2):294-304. PMID: 38263276

6. Yu Zhang, Xiaodong Xi, et al. "Chemically modified in-vitro-transcribed mRNA encoding thrombopoietin stimulates thrombopoiesis in mice." Mol Ther Nucleic Acids. 2022 Aug 13;29:657-671. PMID: 36090760

7. Jingjing Zhang, Yun Li, et al. "Genome-wide CRISPR/Cas9 library screen identifies PCMT1 as a critical driver of ovarian cancer metastasis." J Exp Clin Cancer Res. 2022 Jan 15;41(1):24. PMID: 35033172

8. Jiahui WANG, Youhuang ZHONG, et al. "A novel DNAJ protein, TCAIM, drives proteolysis of α-ketoglutarate dehydrogenase and regulates mitochondrial metabolism." Research Square. January 21st, 2022

9. Jing Lu, Guoliang Lu, et al. "A COVID-19 mRNA vaccine encoding SARS-CoV-2 virus-like particles induces a strong antiviral-like immune response in mice." Cell Res. 2020;1-4. PMID: 32801356

摩尔浓度计算器

质量

= 浓度

x 体积

x 分子量

*在配置溶液时，请务必参考产品标签上、MSDS / COA（可在Apexbio的产品页面获得）批次特异的分子量使用本工具。