Sulfo-NHS-LC-Biotin Kit
生物素化试剂盒，水溶性
特色产品
- 适用于流式细胞仪和荧光显微镜检测
- 准确区分活细胞/凋亡细胞/坏死细胞
- 用于免疫印迹和质谱分析等后续操作
- 适用于30 KDa-130 KDa大小的蛋白
- 对细胞无毒性
- 步骤更简单，无需有机溶剂
- 可将信号灵敏度提高100倍
- 同时保持稳定的特异性和分辨率
- 提供更高的转录效率并抑制免疫激活
- 使用5-moUTP和Cy5-utp修饰
- 优异的扩增效率、可重复性和稳定性
- 卓越的灵敏度和准确性，操作简单
- 优化的缓冲液和T7 RNA聚合酶混合物
- 20 μL反应体系可获得更高的RNA产量
产品描述
Sulfo-NHS-LC-Biotin是一种水溶性生物素化试剂，其NHS-酯基团可与蛋白质、抗体或其他分子表面的伯胺（NH₂-）发生共价反应，形成稳定的酰胺键，从而将生物素标记到目标分子上。该试剂含LC（长链）间隔臂，可提高生物素与链霉亲和素结合的可及性。产品可用于对含伯胺的蛋白质、抗体或其他分子进行生物素化标记，标记后的分子可用于后续与链霉亲和素/亲和素系统的检测、捕获或纯化等应用。
Sulfo-NHS-LC-Biotin试剂盒包含可进行10次生物素化标记反应的所有试剂，包括Sulfo-NHS-LC-Biotin（充足且已活化，可直接使用）、Streptavidin、HABA溶液、PBS包装、Sephadex G-25 PD-10脱盐柱。每个试剂盒包含10个脱盐离心柱，无需透析即可对标记蛋白进行脱盐。该离心柱形式操作简便，单次离心即可完成脱盐，速度快于透析和传统重力凝胶过滤，在推荐样品体积（1.75–2.5 mL）范围内蛋白回收率良好，且能有效去除游离生物素。随后，可使用试剂盒中的HABA溶液和Streptavidin检测标记效率。
试剂盒所含试剂可进行10次生物素化标记反应，每次适用于1–10 mg抗体。
产品特点
·蛋白/抗体标记——生物素化抗体或蛋白质，便于利用链霉亲和素树脂或探针进行固定、纯化或检测
·细胞表面标记——仅标记完整细胞的表面蛋白（试剂带负电，不穿膜）
·胺反应性——与伯胺（-NH₂）反应，如赖氨酸侧链或多肽的氨基末端
·水溶性——sulfo-NHS基团使试剂的水溶性优于普通NHS-酯化合物
·不可逆——形成永久性酰胺键；间隔臂不可裂解
·中等长度——间隔臂（加到目标分子上的总长度）为22.4Å，在足够长度（使生物素结合的空间位阻最小）与适中分子量之间提供良好平衡
·操作简便——标记与脱盐步骤简单快速，无需透析
·效率可测——配套HABA溶液和链霉亲和素，可检测生物素标记效率
产品性质
| 产品有效期 | 12个月 |
| 运输条件 | 蓝冰 |
| 注意事项 | 本产品仅限于科研使用，不得用于临床诊断或治疗。 |
产品组分
| 组分 | 组分货号 | 组分规格 | 保存条件 |
|---|---|---|---|
| Sulfo-NHS-LC-Biotin | A8003 | 25mg | -20°C |
| HABA Solution | B7918S1 | 1mL | 4°C |
| Streptavidin | B7921 | 10mg | -20°C |
| PBS Pack (makes 1 L) | S0001 | 1Package | 4°C |
| Sephadex G-25 in PD-10 Desalting Columns | S0002 | 10columns | 4°C |
运输条件:蓝冰 产品有效期:12个月 | |||
操作说明
常见问题
Q1： 货号K1001-K1006的生物素化试剂盒中，生物素产品与哪些基团反应进行生物素化？
该系列试剂盒中生物素试剂（如Sulfo-NHS-LC-Biotin）上的NHS酯与伯胺反应。在蛋白质和多肽中，伯胺基团一般存在于赖氨酸残基的氨基末端和ε胺（侧链）上。
Q2： 带有磺酸基（Sulfo-）的Biotin与不带的Biotin有什么不同？
磺酸基（Sulfo-）Biotin可增加水溶性，常用于细胞表面标记；non-sulfonated Biotin需用DMSO或DMF等有机溶剂溶解，可透过细胞膜，常用于标记细胞内带有伯胺（NH2-）的蛋白。
Q3： K1001-K1006试剂盒中Biotin产品有什么不同？
第一，带磺酸基（Sulfo-）的Biotin与不带Sulfo-的Biotin膜渗透性、水溶性不同；第二，(Sulfo)-NHS-Biotin试剂是一种短链生物素化试剂，(Sulfo)-NHS-LC-Biotin试剂是一种中等长度的生物素化试剂，(Sulfo)-NHS-SS-Biotin是一种间隔臂包含可裂解的二硫键的生物素化试剂。
Q4： HABA分析常见问题有哪些？
常见问题、可能原因及解决方案如下：
| 常见问题 | 可能原因 | 解决方案 |
| HABA分析时 ΔA500 ≤ 0 | 蛋白质样品没有生物素化或生物素化水平很低，因为蛋白质上可标记的官能团有限 | 使用替代化学方法（例如巯基反应性）重复生物素化，或使用更高摩尔比的生物素化试剂 |
| 试剂混合不充分 | 稀释前完全溶解并混合HABA/链霉亲和素溶液 | |
| 样品中有颗粒 | 过滤蛋白质样品以去除颗粒 | |
| 生物素化水平偏高 | 未反应的生物素未去除 | 分析前对样品进行透析或脱盐 |
Q5： 生物素标记试剂盒怎么选择使用呢？
选择时主要看三点：标记对象（抗体/普通蛋白/Avi-tag 融合蛋白）、是否需要穿透细胞膜（决定选磺化 Sulfo 还是非磺化 NHS）、以及间隔臂长短与是否可逆。各款试剂盒的特点与适用场景见下表：
| 货号 | 产品名称 | 标记方式 | 臂长/可逆 | 蛋白量与纯化 | 用时 |
| K4402 | Avi-tag 蛋白生物素化试剂盒（BirA） | 酶促 · BirA | D-Biotin | 2 nmol 底物蛋白/50 μL 体系 | 30 min |
| K4401 | NHS-LC-LC 生物素化试剂盒 | 非磺化 NHS | 双长臂 LC-LC | 0.1–5 mg 抗体/次 · 超滤管 + 抗体稳定液 | ≤90 min |
| K1005 | Sulfo-NHS 生物素化试剂盒 | 磺化 Sulfo | 短臂 | 1–10 mg 蛋白/次 · 脱盐柱 + HABA 定量 | 1–2 h |
| K1002 | NHS 生物素化试剂盒 | 非磺化 NHS | 短臂 | 1–10 mg 蛋白/次 · 脱盐柱 + HABA 定量 | 1–2 h |
| K1001 | Sulfo-NHS-LC 生物素化试剂盒 | 磺化 Sulfo | 长臂 LC | 1–10 mg 蛋白/次 · 脱盐柱 + HABA 定量 | 1–2 h |
| K1003 | NHS-LC 生物素化试剂盒 | 非磺化 NHS | 长臂 LC | 1–10 mg 蛋白/次 · 脱盐柱 + HABA 定量 | 1–2 h |
| K1006 | Sulfo-NHS-SS 生物素化试剂盒 | 磺化 Sulfo | SS 可逆 | 1–10 mg 蛋白/次 · 脱盐柱 + HABA 定量 | 1–2 h |
| K1004 | NHS-SS 生物素化试剂盒 | 非磺化 NHS | SS 可逆 | 1–10 mg 蛋白/次 · 脱盐柱 + HABA 定量 | 1–2 h |
| K1151 | Sulfo-NHS 生物素化试剂盒（90–180 kDa） | 磺化 Sulfo | 长臂 LC | 50–200 μg 蛋白/次 · 超滤管纯化 | 约 1 h |
| K1152 | Sulfo-NHS 生物素化试剂盒（30–90 kDa） | 磺化 Sulfo | 长臂 LC | 50–200 μg 蛋白/次 · 超滤管纯化 | 约 1 h |
| K1153 | Sulfo-NHS 生物素化试剂盒（10–20 kDa） | 磺化 Sulfo | 长臂 LC | 50–200 μg 蛋白/次 · 超滤管纯化 | 约 1 h |
磺化 Sulfo：水溶性、不穿透细胞膜，适合细胞表面标记与亲水蛋白；非磺化 NHS：可穿膜，需 DMSO 等有机溶剂助溶。
臂长：短臂间隔最短；LC / LC-LC 拉长间隔，改善链霉亲和素结合的空间可达性；SS 二硫键可逆，可用 DTT / TCEP 洗脱回收。
沪公网安备 31011002003500