Foxy-5 TFA

Foxy-5 TFA是Foxy-5（CAS号：881188-51-8）的三氟乙酸盐形式。Foxy-5 是 WNT5A 模拟肽（WNT5A-mimicking / Wnt5a agonist），一条 formylated 六肽，序列：Met-Asp-Gly-Cys-Glu-Leu ，其作为 WNT5A 激动剂/模拟物发挥作用（不是抑制或拮抗）。其靶点为 WNT5A 信号通路：通过模拟 WNT5A 激动 Ryk、Frizzled 及 ROR 家族受体，主要启动非经典 WNT/Ca²⁺ 通路，并可与经典 Wnt/β‑catenin 通路发生交叉。下游涉及 PI3K/AKT、MAPK/ERK、β‑catenin 以及 CXCL12/CXCR4 介导的肌动蛋白重排与细胞趋化等一系列级联。Liu 等（2024）通过 CCK‑8 证实 Foxy‑5 在 ARPE‑19 细胞中的安全剂量范围为 0–300 μmol/L。

在体外应用方面，Foxy‑5 主要用于：① 白血病细胞系 HL60、K562、KG1a、U937 的单培养或与 HS‑5 间质细胞的 2D/3D 共培养，常用浓度 50 μM 和 100 μM，处理 72 h，用于检测增殖、ROS、自噬和 CXCL12 诱导迁移；② 人视网膜色素上皮 ARPE‑19 细胞中，TGF‑β1（10 ng/mL）诱导 EMT 模型，Foxy‑5 使用 50、100、200 μmol/L 处理 48 h，评价 EMT/纤维化相关指标（fibronectin、α‑SMA、active β‑catenin核转位等）。

在动物实验中，Bueno 等采用 8 周龄雌性 NOD/SCID 小鼠皮下接种 U937（5×10⁶）建立异种移植瘤模型，肿瘤达 60–100 mm³ 后开始 治疗性给药：Foxy‑5 2 mg/kg，腹腔注射，每 2 天 1 次，共 9 天。作者估算每次 i.p. 后体内循环浓度约 50 μM，治疗结束时肿瘤体积抑制率约 55.46%，瘤重抑制率约 45.51%（P<0.05）。Liu 等（2024）则在 7 周龄雄性 C57BL/6J 小鼠 532‑nm 激光光凝诱导的 CNV 模型中，仅在体内使用 FH535 与 Box5 玻璃体腔注射，Foxy‑5 只用于 ARPE‑19 的体外实验，未参与 in vivo 给药。

需要强调的是，Foxy‑5 的作用具有明显的 组织 / 细胞类型依赖性：在 WNT5A 低表达的 AML 细胞中，其表现为 WNT5A 模拟的 肿瘤抑制因子（tumor suppressor mimetic），可抑制细胞增殖、ROS 产生、自噬及 CXCL12 趋化，并下调 PI3K/MAPK/β‑catenin 信号；而在 ARPE‑19 视网膜色素上皮细胞中，Foxy‑5 作为 Wnt5a 激动剂则促进 EMT 与纤维化，这与 WNT5A 本身在不同组织中的情境依赖性“双面”作用相一致。

参考文献：

[1] Bueno MLP, Saad STO, Roversi FM. The antitumor effects of WNT5A against hematological malignancies. J Cell Commun Signal. 2023 Dec;17(4):1487-1499. doi: 10.1007/s12079-023-00773-8. Epub 2023 Jun 13. PMID: 37310653; PMCID: PMC10713930.

[2] Liu D, Du J, Xie H, Tian H, Lu L, Zhang C, Xu GT, Zhang J. Wnt5a/β-catenin-mediated epithelial-mesenchymal transition: a key driver of subretinal fibrosis in neovascular age-related macular degeneration. J Neuroinflammation. 2024 Mar 26;21(1):75. doi: 10.1186/s12974-024-03068-w. PMID: 38532410; PMCID: PMC10967154.