EdU Flow Cytometry Assay Kits (488)
mRNA synthesis
In vitro transcription of capped mRNA with modified nucleotides and Poly(A) tail
Tyramide Signal Amplification (TSA)
TSA (Tyramide Signal Amplification), used for signal amplification of ISH, IHC and IC etc.
Phos Binding Reagent Acrylamide
Separation of phosphorylated and non-phosphorylated proteins without phospho-specific antibody
Cell Counting Kit-8 (CCK-8)
A convenient and sensitive way for cell proliferation assay and cytotoxicity assay
SYBR Safe DNA Gel Stain
Safe and sensitive stain for visualization of DNA or RNA in agarose or acrylamide gels.
Inhibitor Cocktails
Protect the integrity of proteins from multiple proteases and phosphatases for different applications.
一种新方法,点击化学-CuAAC(铜催化的叠氮化物-炔烃环加成反应),以及该反应在直接测量细胞周期中S期DNA合成中的应用。 “点击化学”是K. B. Sharpless于2001年引入的一个术语,它是在生物连接中常用的一组具有生物相容性的小分子反应,允许将底物与特定生物分子(例如报道分子)结合在一起。
胸腺嘧啶核苷类似物,EdU(5-ethynyl-2’-deoxyuridine)可以在DNA合成过程中掺入DNA链中。 EdU的炔基是一种生物惰性基团,可以通过CuAAC反应与染料的叠氮基发生极强的选择性反应,从而生成1,2,3-三唑产物。 EdU和6-FAM Azide具有生物学上独特的基团,连接后可以荧光标记增殖细胞的DNA,获得低背景的图像和高检测灵敏度。这种CuAAC反应可在极温和的条件下提供出色的区域选择性和定量转化。该反应是高效的,并且可以通过流式细胞术,荧光计或荧光显微镜以定量方式使用。
EdU是BrdU的理想替代品,因为它不受苛刻的DNA变性条件(通常使用HCl,加热或DNase消化)的影响。在基于BrdU的检测中,需要额外的DNA变性以使BrdU暴露于抗BrdU抗体,此抗体与基于EdU的检测中使用的荧光染料相比体积巨大。与巨大的抗体不同,炔基和叠氮基的体积非常小,因此6-FAM叠氮化物在基于醛的标准固定和去污剂透化作用下就可以进入DNA。此外基于BrdU的测定后的样品,由于使用酸变性方法时,有可能破坏了抗原识别位点,导致细胞周期分布的信号改变。而基于EdU的测定与细胞周期染料兼容。 EdU分析还可以与一些针对表面和细胞内标记的抗体一起并用。但是,某些试剂或抗体偶联物可能与EdU检测反应不兼容,并且可能需要一些其他步骤来确保兼容性。
6-FAM Azide(0最大激发波长为496 nm,最大发射波长为516 nm)。
操作简单,花费时间更少,无需变性步骤或苛刻的处理
效率高,亮度高
与某些抗体和细胞周期染料兼容
由于不使用可变的抗BrdU抗体,因此具有很高的一致性
Components | K1176-100 Test |
EdU (Component A) | 20 mg |
6-FAM Azide (Component B) | 260 μL |
DMSO (Component C) | 8.5 mL |
CuSO4 (100 mM Aqueous Solution) (Component D) | 1 mL |
EdU Buffer Additive (Component E) | 400 mg |
Store the kit at -20ºC away from light and moisture, stable for 1 year. |