C527
mRNA synthesis
In vitro transcription of capped mRNA with modified nucleotides and Poly(A) tail
Tyramide Signal Amplification (TSA)
TSA (Tyramide Signal Amplification), used for signal amplification of ISH, IHC and IC etc.
Phos Binding Reagent Acrylamide
Separation of phosphorylated and non-phosphorylated proteins without phospho-specific antibody
Cell Counting Kit-8 (CCK-8)
A convenient and sensitive way for cell proliferation assay and cytotoxicity assay
SYBR Safe DNA Gel Stain
Safe and sensitive stain for visualization of DNA or RNA in agarose or acrylamide gels.
Inhibitor Cocktails
Protect the integrity of proteins from multiple proteases and phosphatases for different applications.
C527,亦称杂三环1,4-二氢-1,4-二氧-1H-萘,是USP1(去泛素化酶1)/USF1(USP1相关因子1)复合物的抑制剂,体内IC50值为0.88 ± 0.03 μM.C527是体外pan-去泛素化酶抑制剂,对USP1/UAF1复合体具有高纳摩尔的IC50值.
C527在体外抑制USP12/USP46复合体和其他DUB酶的DUB活性.但是,C527对这些DUB酶的IC50值要高于USP1/UAF1复合体.C527对UCH-L1和UCH-L3具有相当小的抑制效应,其为去泛素化酶的不同亚类,作为泛素C-末端水解酶,即使其也是半胱氨酸蛋白酶.
在许多白血病细胞系中,C527促进ID1降解,引起细胞毒性.在小鼠骨肉瘤细胞中,C527促进ID1降解,同时上调p21.在人U20S骨肉瘤细胞中,C527以剂量依赖的方式促进ID1降解.在Hela细胞中,C527处理引起Ub-FANCD2和Ub-FANCl水平的提高,并抑制喜树碱诱导的Rad51灶.USP1抑制剂预处理hela细胞引起丝裂霉素C和喜树碱的细胞毒性增强.
参考文献:
1. Mistry H, Hsieh G, Buhrlage SJ et al. Small-molecule inhibitors of USP1 target ID1 degradation in leukemic cells. Mol Cancer Ther. 2013 Dec;12(12):2651-62. doi: 10.1158/1535-7163.MCT-13-0103-T. Epub 2013 Oct 15.
Physical Appearance | A solid |
Storage | Store at -20°C |
M.Wt | 293.25 |
Cas No. | 192718-06-2 |
Formula | C17H8FNO3 |
Solubility | insoluble in EtOH; insoluble in H2O; insoluble in DMSO |
Chemical Name | 2-(4-fluorophenyl)naphtho[2,3-d]oxazole-4,9-dione |
SDF | Download SDF |
Canonical SMILES | O=C1C2=C(N=C(C3=CC=C(F)C=C3)O2)C(C4=CC=CC=C41)=O |
运输条件 | 蓝冰运输或根据您的需求运输。 |
一般建议 | 不同厂家不同批次产品溶解度各有差异,仅做参考。若实验所需浓度过大至产品溶解极限,请添加助溶剂助溶或自行调整浓度。溶液形式一般不宜长期储存,请尽快用完。 |
激酶实验[1]: | |
体外去泛素化实验 |
纯化的USP5酶购自Boston Biochem。UCH-L1和UCH-L3如前所述。 USP12 / 46是在我们的实验室中制备的,如上所述。如前所述,使用泛素-AMC(Ub-7-amido-4methylcoumarin)作为底物,在含有20mM HEPES-KOH(pH 7.8),20mM NaCl,0.1mg / ml卵清蛋白,0.5mM EDTA和10mM二硫苏糖醇的反应缓冲液中进行反应。 荧光通过FluoStar Galaxy Fluorometer(BMG Labtech)测量。对于Ub-vinylsulfone(VS)测定,将蛋白质与0.5μM终浓度的Ub-VS在30℃温育45分钟,然后进行免疫印迹分析。 |
细胞实验[1]: | |
细胞系 |
人U20S骨肉瘤细胞,Hela细胞 |
溶解方法 |
该化合物在DMSO中的溶解度<2.93mg/mL。为了获得更高的浓度,可以将离心管在37℃加热10分钟和/或在超声波浴中震荡一段时间。原液可以在-20℃以下储存几个月。 |
反应条件 |
0.5, 1和2 μM; 24 h |
应用 |
在人U20S骨肉瘤细胞中,C527以剂量依赖的方式促进ID1降解。在Hela细胞中,C527提高了Ub-FANCD2和Ub-FANCI的水平。C527的预处理还增强了DNA损伤剂(包括Mitomyin C和喜树碱)的细胞毒性。C527抑制喜树碱诱导的Rad51病灶形成并降低同源重组(HR)活性。 |
References: 1.Mistry H, Hsieh G, Buhrlage SJ et al. Small-molecule inhibitors of USP1 target ID1 degradation in leukemic cells. Mol Cancer Ther. 2013 Dec;12(12):2651-62. doi: 10.1158/1535-7163.MCT-13-0103-T. Epub 2013 Oct 15. |
质量控制和MSDS
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