客户合作文章基本信息
标题
Dietary emulsifier carboxymethylcellulose-induced gut dysbiosis and SCFA reduction aggravate acute pancreatitis through classical monocyte activation
期刊 Microbiome
IF值 12.7
DOI 10.1186/s40168-025-02074-1
客户单位
海军军医大学
内容概述
急性胰腺炎的死亡率达20%，且发病率逐年上升。急性胰腺炎发病率升高与超加工食品消费增加正相关。超加工食品含有的乳化剂（如羧甲基纤维素CMC）可能参与急性胰腺炎发病，但缺乏直接证据。
本研究给实验组小鼠喂食CMC后用雨蛙素诱发急性胰腺炎。之后通过对小鼠粪便进行16S rRNA基因测序和短链脂肪酸水平检测，对小鼠外周血进行单细胞转录组测序和生化指标检测，找到目的基因后进行敲低实验，发现CMC导致肠道Akk菌减少和丁酸等短链脂肪酸降低，引发LPS入血，激活C/EBPδ驱动经典单核细胞分化，最终加重急性胰腺炎。因此，CMC是急性胰腺炎发病的潜在风险因素，而Akk菌和丁酸具有潜在临床治疗价值。
引用产品及应用
雨蛙素 Caerulein（CAE） 货号：B8465
雨蛙素是一种与胆囊收缩素（CCK）结构相似的多肽，能特异性激活胰腺腺泡细胞的CCK受体，诱导胰腺炎症反应。
操作步骤详解 雨蛙素诱导的急性胰腺炎小鼠模型
第 1 步：动物准备
选用6周龄雄性C57BL/6小鼠，饲养于SPF级环境，维持12小时光暗循环，温度 20℃、湿度40%-60%，自由进食饮水。
第 2 步：造模实施
①
动物预处理
造模前8小时对小鼠进行禁食处理（不禁水），减少胃肠内容物对胰腺检测的干扰。
②
雨蛙素配制
使用生理盐水将雨蛙素稀释至工作浓度。
③
腹腔注射
按100μg/kg体重的剂量，每1小时为小鼠腹腔注射1次雨蛙素，连续注射8次（多次低剂量注射可模拟人类急性胰腺炎的渐进性发病过程，避免单次高剂量导致的急性致死）。
④
空白对照
对照组小鼠同期腹腔注射等量生理盐水，排除注射操作本身的应激影响
⑤
造模后观察与样本收集
造模后密切观察小鼠的精神状态、活动量、进食饮水情况及粪便性状，评估整体应激反应。首次注射雨蛙素24小时后，处死小鼠并收集关键样本：
a
胰腺组织
迅速分离胰腺，称重后部分固定于10%中性福尔马林（用于病理切片），部分冻存于液氮（用于分子检测）。
b
血液样本
眼眶取血后离心分离血清，用于检测淀粉酶、脂肪酶及炎症因子。
c
其他样本
根据研究需求可收集结肠、粪便等样本，用于关联分析。
第 3 步：模型验证
①
胰腺组织病理学损伤
-
通过HE染色观察胰腺形态学变化，模型组可见胰腺腺泡细胞结构紊乱、水肿、坏死，大量炎症细胞浸润。
-
模型组胰腺/体重比升高，提示胰腺肿胀损伤。
②
血清消化酶水平升高
模型组血清淀粉酶、脂肪酶活性显著高于空白对照组，且差异具有统计学意义（p<0.0001），证实胰腺腺泡细胞受损导致消化酶释放入血。
③
血清促炎因子释放
模型组血清促炎因子IL-6、TNF-α浓度显著升高，表明雨蛙素成功诱导了胰腺炎症的全身性扩散。
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