HPF（羟基苯基荧光素）是一种细胞渗透性的芳香氨基荧光素衍生物，其本身荧光较低。HPF通过羟基自由基，与细胞内过氧亚硝基反应，可产生强烈的绿色荧光。特异性和稳定性更强：它仅在与高反应性氧物种（hROS）如羟基自由基、过氧亚硝酸盐和由过氧化酶/H₂O₂系统生成的hROS反应时发生氧化；HPF 对次氯酸盐离子、硝酸氧、过氧化氢、超氧化物及其他氧化剂无反应。氧化后，HPF 转化为高荧光分子荧光素，其激发/发射峰值分别为490/515 nm，这使得对高反应性生物自由基的直接检测变得简单而直观。HPF可应用于荧光显微镜、高通量成像仪、荧光酶标仪或流式细胞仪。