BCA Protein Assay Kit (Enhanced)
快速高灵敏BCA蛋白定量试剂盒，适用微量或低浓度蛋白样品（20–2000 μg/mL，≥0.2 μg）
| 规格 | 价格 | 货期 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 200tests | ￥175.00 | 现货 | |
| 500tests | ￥332.00 | 现货 | |
| 5000tests | ￥1527.00 | 现货 |
特色产品
- 适用于流式细胞仪和荧光显微镜检测
- 准确区分活细胞/凋亡细胞/坏死细胞
- 用于免疫印迹和质谱分析等后续操作
- 适用于30 KDa-130 KDa大小的蛋白
- 对细胞无毒性
- 步骤更简单，无需有机溶剂
- 可将信号灵敏度提高100倍
- 同时保持稳定的特异性和分辨率
- 提供更高的转录效率并抑制免疫激活
- 使用5-moUTP和Cy5-utp修饰
- 优异的扩增效率、可重复性和稳定性
- 卓越的灵敏度和准确性，操作简单
- 优化的缓冲液和T7 RNA聚合酶混合物
- 20 μL反应体系可获得更高的RNA产量
产品描述
BCA全称是Bicinchoninic Acid Assay，是基于双缩脲原理的蛋白定量方法。在碱性条件下，蛋白质肽键将硫酸铜中Cu2+还原成Cu+，随后BCA鳌合Cu+形成紫色复合物，强烈吸收562 nm波长的光。螯合物的颜色跟蛋白浓度有关，同时反应减少的Cu2+或Cu+获得量与溶液中存在的蛋白质的量成比例，因此可以通过检测蛋白吸光度值获取待测蛋白浓度。该方法广泛应用于细胞裂解液、组织匀浆、纯化蛋白、亚细胞组分及分泌蛋白等各类生物样品的浓度测定，是酶活性分析、电泳上样定量、免疫印迹以及蛋白互作研究等下游实验的重要前处理步骤。
与常规BCA蛋白浓度测定试剂盒相比，本增强型试剂盒的核心区别和优势体现在三方面：①灵敏度更高——检测下限低至10 μg/mL，最小可检测蛋白量仅0.2 μg，待测样品体积仅为1–20 μL，显著优于普通BCA试剂盒，特别适用于微量或低浓度蛋白样品的准确定量；②显色速度更快——在相同蛋白浓度下所需孵育时间显著缩短，可在更短时间内完成吸光度测定，大幅提升实验通量和效率；③线性范围更优——在20–2000 μg/mL浓度范围内呈现良好的线性关系，确保定量结果的准确性和可重复性。
在兼容性方面，本试剂盒可耐受样品中高达5% SDS、5% Triton X-100及5% Tween 20/60/80等常见表面活性剂，适用于含较高浓度去垢剂的裂解液体系。但需注意的是，螯合剂（确保EDTA < 10 mM，不含EGTA）和还原剂（DTT < 1 mM，β-巯基乙醇 < 0.01%）会干扰显色反应，若样品中此类物质含量较高，建议改用Bradford蛋白浓度测定试剂盒（如普通型-K4103和去垢剂兼容型-K4104）。
本试剂盒包含完成BCA定量实验所需的全部组分，包括BCA溶液A（碱性缓冲液）、BCA溶液B（含铜离子的显色剂溶液）、蛋白标准品及其稀释液。为满足不同实验规模的需求，本试剂盒提供约 200次、500次和 5000次检测量三种规格（检测次数以96孔板体系、每孔200 μL反应体系为估算基准）。
产品特点
·灵敏度高：检测下限10 μg/mL，最小检测量0.2 μg，样品仅需1–20 μL。
·显色速度快：孵育时间显著短于普通BCA试剂盒。
·线性范围宽：20–2000 μg/mL范围内线性良好。
·去垢剂兼容性强：耐受5% SDS、5% Triton X-100、5% Tween 20/60/80。
·显色产物稳定：紫色复合物稳定性好，便于批量检测。
·操作简便：双组分工作液（50:1），配制简单，适合高通量。
·适用性广：适用于细胞裂解液、组织匀浆、纯化蛋白、血清等多种样品类型。
产品性质
| 产品有效期 | 12个月 |
| 运输条件 | 蓝冰 |
| 注意事项 | 本产品仅限于科研使用，不得用于临床诊断或治疗。 |
产品组分
| 组分 | 组分货号 | 200tests | 500tests | 5000tests | 保存条件 |
|---|---|---|---|---|---|
| Reagent A | S0866 | 40mL | 100mL | 2x500mL | 4°C |
| Reagent B | S0027 | 1.2mL | 3mL | 30mL | 4°C |
| Bovine serum albumin (BSA) | S0028 | 20mg | 30mg | 2x30mg | 4°C |
| BCA Protein Assay Reagent | S0029 | 1mL | 1.5mL | 5mL | 4°C |
运输条件:蓝冰 产品有效期:12个月 | |||||
操作说明
常见问题
本试剂盒的检测范围是多少？
答：标准微孔板法检测范围为 20–2000 μg/mL。若样品浓度超出此范围，建议稀释后重新测定；浓度过低时可使用灵敏度更高的微量BCA试剂盒。
哪些物质会干扰BCA测定？
答：主要干扰物质包括三类：还原剂（如DTT、β-巯基乙醇）：会还原Cu²⁺产生高背景；螯合剂（如EDTA、EGTA）：结合铜离子，阻止显色反应；高浓度缓冲液：可能影响反应所需的碱性pH。具体兼容浓度：EDTA < 10 mM，DTT < 1 mM，β-巯基乙醇 < 0.01%，EGTA任何浓度均不兼容。
样品含有干扰物质，如何处理？
答：可采用以下方法：稀释样品：若蛋白浓度足够高，稀释至干扰物质不再影响测定；透析或脱盐：置换为兼容的缓冲体系；蛋白沉淀：用冷丙酮或三氯乙酸（TCA）沉淀蛋白，去除含干扰物的上清后重溶测定；调整工作液：针对螯合剂干扰，可适当增加试剂B的用量。
每次实验都需要重新制作标准曲线吗？
答：建议每次实验都重新制作标准曲线。因为显色反应受温度和孵育时间影响，即使条件控制良好，不同批次的吸光度也可能存在差异，重新制作标准曲线可确保定量准确性。
BCA法能定量多肽吗？
答：分子量 小于2000 Da的多肽无法用BCA法定量。因为显色依赖于蛋白质的肽键数量及半胱氨酸、色氨酸、酪氨酸等氨基酸残基的存在。小分子多肽建议使用荧光胺法或其他多肽定量专用试剂盒。
没有562 nm滤光片，可以用其他波长吗？
答：可以。BCA-Cu⁺复合物的最大吸收峰在562 nm，若仪器不具备562 nm滤光片，可在 540–590 nm 范围内测定。但需注意，偏离562 nm会导致标准曲线斜率降低，可能影响灵敏度。
BCA工作液可以保存多久？
答：BCA工作液（试剂A与试剂B按50:1混合后）在室温条件下24小时内稳定。建议现配现用，配制时可额外多配1–2个样品的用量以弥补操作损耗。
不同蛋白质对BCA的反应是否一致？
答：不同蛋白质对BCA反应存在一定差异，主要与其氨基酸组成（半胱氨酸、酪氨酸、色氨酸含量）及结构有关。但BCA法比Bradford法的蛋白间变异更小，因为肽键骨架本身也会参与显色反应。如需极高准确性，建议使用目标蛋白纯品制作标准曲线。
为什么显色反应颜色过深或过浅？
答：可能原因及对策：样品浓度过高/过低：调整稀释倍数使读数落在标准曲线范围内；干扰物质影响：检查样品中是否存在还原剂、螯合剂等干扰物；孵育条件不一致：确保每次实验的温度和时间一致；多种干扰物叠加效应：即使单一物质在兼容浓度内，组合后仍可能产生干扰
请问BCA 蛋白浓度测定时，待测样品是水溶液，可否用纯水直接溶解 BSA 蛋白标准品，而不用试剂盒里的 BSA 蛋白标准配制液？
答：BSA 溶解还是需要使用试剂盒自带的蛋白标准配制液，后续标准品的稀释可以使用水。
该蛋白标准品 BSA 用什么稀释？
答：标准品稀释液为蛋白样品的溶解液，原则上，蛋白样品在什么溶液中，标准品也宜用什么溶液稀释。但也可用 0.9%的NaCl 或 1×PBS 进行稀释。
试剂盒中的BSA 标准品可以另外购买吗？
答：可以的，我们公司提供有单独的BSA 标准品，即Bovine Serum Albumin Standard (5 mg/mL)（货号K4105）。
每次测定时都需要做标准曲线吗？
答：是的，建议每次测定时都做标准曲线。因为BCA法测定时颜色会随着时间的延长不断加深，并且显色反应的速度和温度有关，所以除非精确控制显色反应的时间和温度，否则如需精确测定宜每次都做标准曲线。
沪公网安备 31011002003500