定量PCR（qPCR，又称Real-time PCR）是一种非常通用的精确分析基因表达的技术。按方法不同可分为染料法和探针法两类，其中染料法更通用、方便、成本更低。基于染料的qPCR法通过实时监测结合双链DNA的染料发射的荧光，可以在PCR的每个周期间接测量DNA扩增。当在某一个时间点上，检测到的荧光信号显著超过背景，就可以确定Ct值（Cq值）。所获得的Ct值可用于评估目标基因的相对丰度，也可根据适当的标准曲线计算获得绝对数量。

One-step Universal Green RT-qPCR Kit作为便捷高效的一步法RT-qPCR试剂盒，利用双链DNA（dsDNA）结合染料SYBR Green I的实时荧光信号来监测每个PCR循环后的DNA扩增，可对靶标RNA序列进行染料法实时定量分析。试剂盒SYBR green RT-qPCR Enzyme Mix中使用了结合抗体的热启动Taq DNA聚合酶和新型逆转录酶，具有较高的热稳定性，推荐的逆转录温度为55℃，也可以在50℃-55℃之间调节。2×SYBR Green RT-qPCR Reaction Buffer包含dNTP、SYBR Green Ⅰ及所有必需的缓冲液成分。预混液中还含有独特的惰性参比染料，兼容多种qPCR仪器，包括需要高ROX或低ROX参比信号的仪器。此外，预混液使用thermolabile UDG+dUTP的防污染体系，从而保证qPCR扩增结果的准确性，并减少气溶胶污染导致的假阳性结果。本试剂盒使用的非荧光可见示踪染料，便于观察反应体系的建立，且该染料不会干扰实时检测。