Dihydroethidium（二氢乙啶），也可以称为hydroethidine，是一种最常用的细胞膜渗透性的超氧化物阴离子（O2-）荧光检测探针。可以直接用于活细胞的氧化活性检测，包括ROS（活性氧）和超氧化物的检测。

Dihydroethidium进入活细胞后，在超氧化物阴离子作用下脱氢，氧化生成乙锭（ethidium）。乙锭可以和DNA结合，产生红色荧光。当细胞内的超氧化物阴离子水平较高时，产生的乙锭较多，红色荧光就较强，反之则较弱。Dihydroethidium本身呈蓝色荧光（λEx /λEm：355 / 420nm），直至被氧化为乙锭，然后嵌入DNA内，使细胞核呈明亮的红色荧光（λEx /λEm：518/605 nm），可用荧光显微镜和流式细胞仪等仪器检测[1-2]。

Dihydroethidium的荧光可以被O2-清除剂抑制，如超氧化物歧化酶（SOD）和一氧化氮（NO）[3]。活性氧（ROS）是含氧的化学反应性化学物质。包括过氧化物，超氧化物（O2-），羟基自由基（•OH），单线态氧，和α-氧。O2-参与信号传导途径，是氧化应激的常见标志物。准确检测O2-的水平对于研究多种生理和病理现象至关重要，例如细胞增殖，凋亡，心血管疾病，糖尿病和癌症等。

 [1] Michalski R, Michalowski B, Sikora A, et al. On the use of fluorescence lifetime imaging and dihydroethidium to detect superoxide in intact animals and ex vivo tissues: a reassessment. Free Radic Biol Med. 2014;67:278–284.

[2] Wang Q, Zou MH. Measurement of Reactive Oxygen Species (ROS) and Mitochondrial ROS in AMPK Knockout Mice Blood Vessels. Methods Mol Biol. 2018;1732:507–517. doi:10.1007/978-1-4939-7598-3_32

[3] Chen J, Rogers SC, Kavdia M. Analysis of kinetics of dihydroethidium fluorescence with superoxide using xanthine oxidase and hypoxanthine assay. Ann Biomed Eng. 2013;41(2):327–337.