Q1

实验中经常用PMSF来保护蛋白，蛋白酶抑制剂Cocktail和它比有什么优势？

PMSF只能抑制一种蛋白酶（丝氨酸蛋白酶），Cocktail抑制的更全面且更加持久；此外，PMSF毒性较高并且PMSF更容易降解失效。

Q2

抑制剂Cocktail可以反复冻融吗？

可以反复冻融，但是尽量减少反复冻融的次数。

Q3

应该选择片剂的Cocktail还是溶液型Cocktail？

两种类型的产品都含有添加物，片剂中含有若干种公司专利的未经公开的医药成分，而溶液型产品中含有溶剂成分DMSO。一般来说这些添加物是不会影响产品效果的。溶液型需要的加工步骤少，因而质量好、价格低，而片剂产品在储存和运输两个环节具有优势，如片剂能够在4°C储存而不需要-20°C。

Q4

添加过Cocktail但是蛋白仍然降解是为什么？

蛋白酶抑制剂Cocktail作用是保护蛋白免受蛋白酶降解，提高蛋白得率，对于绝大多数蛋白，Cocktail都有很好的效果。如果还是出现蛋白得率低的情况，可检查实验操作步骤和设计，减少导致蛋白降解的环节，例如，细胞处理前，先要将Cocktail加入到裂解液中并混匀，收集完细胞后立即加入准备好的裂解液。

Q5

磷酸酶酶抑制剂cocktail（K1015，2 Tubes）中可否将A、B两管产品混合后再加入裂解液中？

若将A管与B管预先混合，会生成浅绿色沉淀，该沉淀主要为析出的盐类物质。由于沉淀会对A管中的盐类成分及B管中的天然化合物均产生影响，且此沉淀无法完全重新溶解，因此需避免采用这种混合方式，而应依照说明书要求，分别加入两管产品。

Q6

Western Blot实验时磷酸化蛋白和非磷酸化蛋白的条带都非常弱应该怎么解决？

首先保证蛋白上样量足够；其次需要同时加入蛋白酶抑制剂Cocktail和磷酸酶抑制剂Cocktail来保护蛋白不被降解。

Q7

磷酸酶酶抑制剂cocktail（K1015，2 Tubes）中，为什么A管的融化时间比B管的长？

因为A管的溶剂是DMSO，B管的溶剂是ddH2O，相比之下DMSO融化的速度更慢，特别是在低温条件下。可采用在25°C水浴中融化，亦可将A管分装成多个小管。

Q8

是否提供同时包含蛋白酶抑制剂Cocktail和磷酸酶抑制剂Cocktail的产品，且是单管包装便于实验呢？

货号是K4006的产品含有蛋白酶抑制剂Cocktail和磷酸酶抑制剂Cocktail两种组分，且是EDTA free的，可以用于Phosbind（F4002）对磷酸化蛋白的检测。 货号K4005的产品较K4006增加了单独一管EDTA。

Q9

Cocktail是否可以用于质谱实验（MS）？

货号是K4001的产品含有蛋白酶抑制剂Cocktail组分，专门开发用于下游质谱实验。

Q10

金属蛋白酶抑制剂Cocktail中货号K4002和K1007的产品怎么选择？

这两个产品都是通用型产品，K4002增加了金属蛋白酶抑制剂，适用的范围会有增加。