HyperFusion™ high-fidelity PCR Kit
mRNA synthesis
In vitro transcription of capped mRNA with modified nucleotides and Poly(A) tail
Tyramide Signal Amplification (TSA)
TSA (Tyramide Signal Amplification), used for signal amplification of ISH, IHC and IC etc.
Phos Binding Reagent Acrylamide
Separation of phosphorylated and non-phosphorylated proteins without phospho-specific antibody
Cell Counting Kit-8 (CCK-8)
A convenient and sensitive way for cell proliferation assay and cytotoxicity assay
SYBR Safe DNA Gel Stain
Safe and sensitive stain for visualization of DNA or RNA in agarose or acrylamide gels.
Inhibitor Cocktails
Protect the integrity of proteins from multiple proteases and phosphatases for different applications.
HyperFusion™高保真DNA聚合酶由Pyrococcus样校正聚合酶与DNA结合结构域融合形成。正因如此，HyperFusion™ DNA聚合酶能够以非常高的速度和准确性生成PCR产物。此外，HyperFusion™ DNA聚合酶耐受各种抑制剂，允许以最少的优化步骤进行稳健的扩增。HyperFusion™ DNA聚合酶是克隆的理想选择，可用于长片段或难扩增片段（富含GC）的扩增。HyperFusion™高保真DNA聚合酶已成为高要求应用的选择，如全基因组大规模并行高通量测序。 高保真DNA聚合酶主要用于扩增需要保证序列正确的DNA序列。其独特的结构，一种新型Pyrococcus样酶与具有增强合成能力的结构域融合，增加了保真度和速度。HyperFusion™ DNA聚合酶是克隆的理想选择，可用于长片段或难扩增片段的扩增。HyperFusion™是可用的最准确的热稳定聚合酶之一，错误率比Taq DNA聚合酶低50倍以上，比Pyrococcus furiosus （Pfu） DNA聚合酶低6倍。HyperFusion™ DNA聚合酶具有5'→3'聚合酶活性，3'→5'核酸外切酶活性，产生平端产物。 HyperFusion™ DNA聚合酶配有标准5X HyperFusion™ HF缓冲液，可用于复杂或富含GC的模板。
1. 高保真度—比Taq酶高50倍; 比Pfu DNA聚合酶高6倍；
2. 增强的稳健性—更少的反应失败率和最少的优化步骤；
3. 提高产量—以最小酶量（0.5-1U /50μL反应）获得高产率；
4. 高速度—持续合成能力的增加允许更短的反应时间（15-30 s/kb，比Pfu快10倍）；
5. 多功能—可用于常规PCR以及长片段或难扩增（富含GC）模板的扩增。
| 溶液 | 浓度 | 储存 |
| HyperFusion™高保真DNA聚合酶 | 1,000 units/mL | -20°C |
| 5X HyperFusion™ HF缓冲液 | 5 X | -20°C |
| dNTP Mixture | 2.5 mM | -20°C |
| MgCl2溶液 | 50 mM | -20°C 或室温 |
| DMSO | 100% | -20°C 或室温 |
| 产品来源 | 携带HyperFusion™ DNA聚合酶基因的大肠杆菌菌株。 | |
1）Q：HyPerFusion扩增后的产物是否带A，若后面要做TA克隆该如何操作？
A：使用HyPerFusion DNA聚合酶产生的PCR产物具有平末端。如果下一步是克隆，那么推荐使用平端克隆。如果您期望选择T/A克隆，那么DNA应该在A突出加入前纯化（任何剩余的HyPerFusion DNA聚合酶将降解A突出，再次产生平端）。可以用Taq DNA聚合酶或Klenow exo-酶添加无模板的A突出。可以在10 μL反应混合物中用1X Taq缓冲液、2.5mM MgCl2、0.2mM dATP和1U Taq DNA聚合酶在72°C孵育30分钟。
2）Q：PCR扩增产物条带弥散或者拖尾？
A：可能原因及解决方案如下：
(1) 引物降解：可更换引物排除是否因存储存不当而使引物降解。
(2) 反应程序不够优化：可能退火温度不合适，对退火温度设置梯度，摸索最佳的退火温度。
(3) HyPerFusion DNA聚合酶量过多：一般按0.5-1U /50 μL反应加入。
(4) 模板降解或过量：可通过电泳检查模板完整性及浓度，必要时重新制备模板。
(5) 琼脂糖凝胶制备不当：待琼脂糖完全融化后再加入制胶槽。
3）Q：PCR扩增产物条带大小与理论不符？
A：可能原因包括：(1) 实验操作不当体系导致污染污染：对工作台进行清洁，使用全新的试剂和耗材重复实验；(2) 模板或引物拿错：更换正确的模板和引物重新实验；(3) 存在基因亚型：可对研究的基因进行序列分析和BLAST研究，确保是否存在基因亚型。
4）Q：空白对照扩增出现条带？
A：可能原因包括： (1) 引物设计不合理：扩增序列与非目的扩增序列有同源性，PCR也可以扩增出非靶序列的序列；(2) 若扩增产物条带大小与目的条带一致，说明有污染，使用全新的试剂和耗材重复实验。
5）Q：PCR扩增特异性差，出现较多非特异性条带？
A：可能原因包括：(1) 引物设计不佳：引物与靶序列有非特异性互补或自身聚合成二聚体，可降低引物浓度或重新设计引物；(2) 模板不纯或被污染：需重新制备模板；(3) PCR程序设计不够优化：如果出现比目的条带小的杂带，可通过提高退火温度，降低循环数调整；如果出现比目的条带大的杂带，可缩短延伸时间、降低循环数；(4) HyPerFusion DNA聚合酶加入过多：一般按0.5-1U/50 μL反应加入。
6）Q：PCR扩增效率低后无扩增条带？
A：可能原因包括： (1) 引物：检查引物是否因存储不当而降解，引物设计是否合理；(2) 模板：长期放置、反复冻融会导致模板断裂、开环或降解，应使用新鲜制备的DNA双链作为模板；模板GC含量过高会导致DNA的双链无法打开；若模板为cDNA，要确认逆转录所用RNA的纯度及完整度；(3) 扩增体系：反应体系配制错误，建议重复实验；(5) 反应程序温度：如果变性温度过高，酶在前几个循环就迅速失活，温度过低则模板变性不彻底；若退火温度不合适，可对退火温度设置梯度，摸索最佳的退火温度；检查延伸时间是否充足；(6) Mg2+浓度：Mg2+浓度过低可影响PCR产量甚至使PCR扩增失败，Mg2+浓度过高会降低PCR的特异性。