DNase Activity Fluorometric Assay Kit

脱氧核糖核酸酶(DNase)是一种普遍存在于环境和许多生物材料中的酶。由于DNA酶能够降解DNA，其存在对许多分子生物学实验构成了威胁。PCR等检测方法需要依赖于不含DNase酶的塑料、化学品和溶液。已发表的检测DNase的方法通常是耗时的，不能定量的，并且检测灵敏度较低。相比之下，DNase Activity Fluorometric Assay Kit是一种快速、方便的检测方法，可以在10分钟或更短的时间内检测到DNase污染。

本产品包含一种独特的底物，该底物同时标记有荧光报告基因和暗淬灭剂。由于fluor和淬灭剂接近，未裂解的底物只发出极少的荧光。当存在DNA酶时，fluor和淬灭剂之间的键被切断，导致在适当光波长下激发时会发出明亮的绿色信号。底物的切割程度与DNA酶污染水平成正比，可通过荧光计上增加的荧光来监测。

本试剂盒可用于检测可裂解双链DNA的DNase I及其他的DNA核酸酶，甚至能切割单链DNA的酶，如Exonuclease III、mung bean nuclease、micrococcal nuclease、Bal31 nuclease、S1 nuclease、T7 endonuclease等。同时大多数用于DNA的反应缓冲液和溶液都可以用本试剂盒进行测试，但一些系统是不兼容的，如（1）凝胶Loading buffer和其他深色溶液：深色溶液可能干扰荧光的激发或阻挡其发光，使其与本产品检测系统不兼容；（2）抑制DNase活性的溶液：由于DNase必须有活性才能进行检测，因此抑制DNase活性的溶液在本产品检测系统中不能检测可靠的结果。已知常见的抑制DNase的溶液有高离子强度溶液(如5 M NaCl，20 X SSC，3 M醋酸钠等)，pH值小于4或pH值大于9的溶液，离散剂、洗涤剂、螯合剂或任何使蛋白质变性的溶液（如SDS、硫氰酸胍、尿素、EDTA等）；（3）导致本产品底物化学性质不稳定的溶液：化学降解该底物的溶液也不适合与本产品检测系统进行测试，它们可能会产生错误的积极信号。本产品底物在以下类型的溶液中不稳定，如pH值大于9的溶液和腐蚀性溶液（强酸、强碱、漂白剂）。

本试剂盒（500 T）中包含足以用于5×96次高通量测定的试剂，可在简单易用的荧光测定中实现对DNA酶的灵敏检测，并实时提供结果，同时具有在几分钟内检测一系列不同DNase、在DNase敏感型应用（如PCR）之前认证塑料、酶、溶液和其他生物材料不含DNase等。