SuperSignal ECL Chemiluminescent Substrate Detection Kit (Ultrasensitive)
特超敏版ECL检测试剂盒
特色产品
- 适用于流式细胞仪和荧光显微镜检测
- 准确区分活细胞/凋亡细胞/坏死细胞
- 用于免疫印迹和质谱分析等后续操作
- 适用于30 KDa-130 KDa大小的蛋白
- 对细胞无毒性
- 步骤更简单，无需有机溶剂
- 可将信号灵敏度提高100倍
- 同时保持稳定的特异性和分辨率
- 提供更高的转录效率并抑制免疫激活
- 使用5-moUTP和Cy5-utp修饰
- 优异的扩增效率、可重复性和稳定性
- 卓越的灵敏度和准确性，操作简单
- 优化的缓冲液和T7 RNA聚合酶混合物
- 20 μL反应体系可获得更高的RNA产量
产品描述
SuperSignal ECL Chemiluminescent Substrate Detection Kit (Ultrasensitive)是一款具有特超高灵敏度的增强型化学发光(ECL)底物和特超长发光时间的ECL发光液，发光时间可长达16 h。可通HRP实现实现低飞克级(以HRP浓度为准)的免疫印迹检测，其灵敏度，发光时间和背景均明显优秀。
有以下特点：
- （1）灵敏：使用适当的一抗和二抗时，可在硝化纤维膜或PVDF膜上检测丰度为飞克级的蛋白条带。
- （2）定量：所得信号的可定量检测范围跨越两个数量级。
- （3）明亮信号：通过胶片或成像系统进行曝光，易于捕获图像。
- （4）长信号持续时间：优化条件下，可检测的光信号输出长达16小时。
- （5）稳定试剂：试剂盒组分能够在4°C条件下稳定放置一年，在室温下可稳定放置6个月。
- （6）价格经济： 配方经过优化，可适用于浓度极低的抗体检测。
当本产品底物与优化的抗体浓度和封闭缓冲液配合使用时，可检测到常规ECL底物无法检测的低丰度靶标蛋白。
产品性质
| 产品有效期 | 12个月 |
| 运输条件 | 蓝冰 |
| 注意事项 | 本产品仅限于科研使用，不得用于临床诊断或治疗。 |
产品组分
| 组分 | 组分货号 | 100mL | 500mL | 保存条件 |
|---|---|---|---|---|
| SuperSignal ECL Chemiluminescent Substrate Detection Kit (Ultrasensitive) -A | S0369 | 50mL | 250mL | 4°C避光 |
| SuperSignal ECL Chemiluminescent Substrate Detection Kit (Ultrasensitive) -B | S0370 | 50mL | 250mL | 4°C避光 |
运输条件:蓝冰 产品有效期:12个月 | ||||
生物相关数据
操作说明
常见问题
1. 胶片上出现反转像，即黑色背景、白色条带，是什么原因？
答：这通常是由于系统中HRP过多导致底物被迅速耗尽所致。建议将HRP标记的二抗稀释至少10倍，即可有效改善此问题。
2. 膜上出现褐色或黄色的条带，是什么原因？
答：这种现象多与发光显色条件不当有关，如底物显色时间过长、曝光时间过长或底物在光照下发生衰减、沉积所致。可通过缩短显色/曝光时间、优化显色条件来减轻此现象。
3. 化学发光信号持续时间少于8小时，可能是什么原因？
答：信号持续时间过短通常是因为系统中HRP过多，过量的HRP会迅速耗尽底物，导致信号快速衰减。解决方法是将HRP标记的二抗稀释至少10倍。
4. 信号弱或无信号，可能有哪些原因？该如何解决？
答：常见原因及对应解决方案包括：①若系统中HRP过多，底物会被迅速耗尽，信号短暂后快速衰减：应将HRP标记二抗稀释至少10倍；②若抗原或抗体用量不足：应适当增加抗体或抗原的用量；③若蛋白质转移效率低：需优化转印条件（如转印时间、电流/电压、缓冲液成分等）；④若HRP或底物活性降低：需通过活性检测确认，并更换失活的试剂。
5. 背景过高，可能有哪些原因？该如何解决？
答：高背景常见原因及对应解决方案包括：①系统中HRP过多：将HRP标记的二抗稀释至少10倍；②封闭不充分：优化封闭条件，如延长封闭时间、调整封闭温度或摇床速度；③封闭试剂不合适：尝试不同类型的封闭试剂，如脱脂奶粉、BSA或血清等；④洗涤不充分：增加洗涤次数、延长洗涤时间或增大洗涤缓冲液体积；⑤胶片过度曝光：缩短曝光时间，必要时使用背景消除剂；⑥抗原或抗体浓度过高：适当降低抗原或抗体用量。
6. 蛋白质条带内部出现斑点，是什么原因？该如何解决？
答：常见原因及对应解决方案包括：①蛋白质转膜效率低或不均匀：应优化转印流程，如检查转印电压、时间和缓冲液组成，确保转印均一；②膜的水化不均匀：按照制造商建议充分水化膜，避免局部干燥或水化不足；③胶片与膜之间存在气泡：曝光前仔细排除膜与胶片之间的气泡，确保二者紧密贴合。
7. 胶片背景上出现斑点，是什么原因？该如何解决？
答：背景斑点通常是由于HRP标记二抗溶液中存在聚集物所致。解决方法是在使用前用0.2µm过滤膜对二抗工作液进行过滤，以去除聚集物。
8. 出现非特异性条带，是什么原因？该如何解决？
答：常见原因及对应解决方案包括：①系统中HRP过多：应将HRP标记的二抗稀释至少10倍，以减少非特异性结合信号；②SDS可能引起蛋白的非特异性结合：建议在检测（抗体孵育和显色）过程中避免使用SDS。
9. 如何检测HRP或底物系统的活性是否正常？
答：可按以下步骤检测：在暗室中，于一个清洁试管内制备1–2mL底物工作液；关闭灯光，向其中加入1µL未稀释的HRP标记二抗工作液；若系统活性正常，该溶液应立即发出蓝色光，且蓝光信号会在随后的几分钟内逐渐减弱。
沪公网安备 31011002003500