Propidium iodide

Propidium iodide，简称PI，中文名称碘化丙啶，是一种常用的红色细胞核染色试剂。PI作为溴化乙锭（EB）的类似物，可嵌入双链DNA中，这种结合没有序列偏爱性，每4-5个DNA碱基对结合一个染料分子[1]。当与DNA结合时，PI的红色荧光增强20到30倍。PI也能与RNA结合，因此需要用核酸酶（nucleases）处理以区分RNA 和DNA染色。

PI进入细胞的能力取决于膜的渗透性。由于存在完整的质膜，PI不会进入活细胞或早期凋亡细胞，但却能穿过破损的细胞膜（细胞处于坏死或晚期凋亡时）[2-3]。

利用这一特性，通常与Calcein-AM、Hoechst 33258或 Hoechst 33342等活细胞荧光探针一起使用，同时对活细胞和死细胞染色和鉴定，用于细胞凋亡和坏死相关的研究。Annexin V / PI联用是研究凋亡细胞的常用方法[2]。PI通常用于鉴定群体中的死细胞，并在多色荧光技术中用作复染，因为PI被认为只能穿透具有破裂膜的细胞，并且通常被阻挡在活细胞之外。PI的单独染色也可以进行细胞周期的检测。

PI没有与DNA结合时，最大激发和发射波长分别为493 nm和636 nm。PI-DNA复合物的最大激发和发射波长分别为535 nm和615 nm。PI可用于荧光显微镜、流式细胞仪以及荧光计检测。

 [1] Stiefel P, Schmidt-Emrich S, Maniura-Weber K, et al. Critical aspects of using bacterial cell viability assays with the fluorophores SYTO9 and propidium iodide. BMC Microbiol. 2015;15:36.

[2] Rieger AM, Nelson KL, Konowalchuk JD, et al. Modified annexin V/propidium iodide apoptosis assay for accurate assessment of cell death. J Vis Exp. 2011;(50):2597.

[3] Newbold A, Martin BP, Cullinane C, et al. Detection of apoptotic cells using  propidium iodide staining. Cold Spring Harb Protoc. 2014 Nov 3;2014(11):1202-6.