支原体（Mycoplasma）是一类可以在无生命培养基上生长繁殖的最小的原核微生物，其大小仅为0.1-0.3 μm，可透过一般过滤膜（0.22~0.45 μm）。当细胞被支原体污染时，细胞内的DNA、RNA和蛋白表达会发生改变，这严重影响细胞的功能。但是支原体体积过小，肉眼一般难以察觉，所以在细胞培养过程中应定期进行支原体检测。

目前检测支原体污染的方法有很多，如培养法、荧光染色法和ELISA等。但是这些方法大多数检测时间比较长、操作比较复杂、灵敏度不高。PCR法是一种操作相对简单的检测手段，PCR扩增后可以通过电泳分析是否存在支原体污染。

PCR支原体检测试剂盒（PCR Mycoplasma Detection Kit）是一种通过巢式PCR特异性检测支原体的试剂盒。巢式PCR是利用两对引物对支原体基因组DNA先后进行两次扩增，比常规的PCR检测更灵敏。其检测原理如图1所示，原核生物的rRNA碱基序列是非常保守的，而rRNA操纵子上编码rRNA的DNA间隔区（Space region）在各种生物种属间碱基序列差别很大，如16S和23S之间的间隔区。同理这个间隔区的DNA序列和长度在支原体各种属间既有保守的部分，也有差异很大的部分。因此可以在编码16S和23S的保守区域DNA上设计一对F1/R1引物用于扩增，这就是巢式PCR的第一轮PCR (1st PCR)，可用于初步判断是否有支原体污染；然后可以在编码16S和23S rRNA的DNA间隔区的保守区上设计一条F2引物，在编码23S rRNA的DNA上设计一条R2引物进行巢式PCR的第二轮扩增(2nd PCR)以进一步确认。相比于普通PCR，巢式PCR可以大大提高检测的特异性和灵敏度。

本试剂盒可以快速，高效且高灵敏地检测支原体污染，同时本试剂盒提供阳性对照Positive Control以便确认本试剂盒是否正常检测以及样品中是否含有PCR反应阻碍物。如果用本试剂盒检测后发现存在支原体污染，可以直接将污染细胞丢弃；如果细胞比较珍贵，可以考虑用支原体清除试剂处理细胞。