NAD+/NADH Assay Kit (Colorimetric)

烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD）是一种存在于所有细胞中的关键辅酶，包括NAD⁺（氧化型）和NADH（还原型）两种形式。作为氧化还原反应的核心电子载体，NAD⁺不仅直接参与能量代谢，还通过多种酶促反应调控细胞生命活动。例如，Sirtuins家族去乙酰化酶依赖NAD⁺作为底物，通过调节蛋白质乙酰化水平影响细胞代谢与基因表达。此外，NAD⁺水平与细胞凋亡、氧化还原稳态及信号通路调控密切相关，其动态平衡（包括合成、降解及与NADH的相互转化）对维持细胞正常功能至关重要。因此，检测NAD⁺/NADH比例可以为研究细胞能量代谢状态、氧化还原平衡及疾病机制提供重要依据。

本试剂盒采用比色法，可同步测定样本中NAD+和NADH的含量，并计算二者比值。其原理如下：首先，利用乙醇脱氢酶（ADH）催化乙醇生成乙醛的反应，将样本中的NAD⁺还原为NADH。随后，在电子耦合试剂1-mPMS的作用下，NADH将WST-8还原为橙黄色甲臜产物。该甲臜在450 nm处的吸光度与样本中NAD⁺和NADH的总含量呈正比。为特异性测定NADH，另取样本经60°C加热30分钟以完全降解NAD⁺，剩余的NADH通过相同反应体系生成甲臜，从而定量NADH含量。最终结合总NAD（NAD⁺+NADH）与NADH的检测结果，即可计算出样本中NAD⁺浓度及NAD⁺/NADH比值。