Hyper Gibson Assembly Cloning Kit

DNA无缝克隆技术是新一代克隆方法，基于插入片段和线性化载体的末端同源重组的原理，允许将DNA片段精确地插入到质粒载体的任意位点，而不留下任何额外碱基序列，如图1所示。这种技术与传统的依赖限制性内切酶-连接酶的克隆方法不同，后者通常会在插入位点留下如限制酶切割位点等多余的序列。

Gibson Assembly无缝克隆试剂盒使用非常简便，进行基因克隆时没有酶切位点的限制，仅需在载体的预定克隆位点通过酶切或PCR的方法制备线性化载体，并在插入片段的两个PCR引物的5'端引入与载体克隆位点两端完全一致的15-25 bp的重叠序列即可进行重组反应，最快仅需5分钟即可完成单片段重组，且阳性率高于95%。试剂盒中mix组分添加的辅助因子，可有效提高克隆阳性率，以及经优化的反应体系，能够一定程度上耐受未纯化PCR产物中含有的杂质。另外试剂盒额外提供两端已有重叠序列的线性化质粒及DNA片段，可直接进行无缝重组以用于阳性对照。