CFDA-SE

CFDA SE，全称为Carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester，具有细胞膜通透性，一种广泛用于活细胞示踪或细胞增殖检测的荧光染料。CFDA SE本身不发光，进入活细胞后可以被细胞内的酯酶催化分解成CFSE，CFSE可发强烈的绿色荧光，后者不能穿透细胞膜，能完好的保留在细胞内。CFSE可以偶发性地并不可逆地和细胞内蛋白的Lysine残基或其它氨基发生结合反应，从而标记上这些蛋白。被CFDA SE标记的非分裂细胞的荧光非常稳定，稳定标记的时间可达数个月。

CFDA SE标记细胞的荧光非常均匀和稳定，荧光可平均分配至两个子代细胞中[1]，这样每分裂一次子代细胞的荧光会减弱一半，通过流式细胞仪检测就可以检测出没有分裂的细胞，分裂一次的细胞(1/2的荧光强度)，分离两次的细胞(1/4的荧光强度)，分裂三次的细胞(1/8的荧光强度)以及类似的更多分裂次数的细胞。使用CFDA SE检测可以提供整个细胞群中有多少比例的细胞分裂了1次、2次或更多次数，可以检测分裂多达8次或更多次数的细胞增殖[2]。

目前CFDA SE标记细胞后通常用流式细胞仪进行细胞增殖检测。最常用于淋巴细胞的增殖检测，也可以用于成纤维细胞、NK细胞等其它细胞的增殖检测，甚至还可以用于细菌增殖的检测。CFDA SE标记细胞呈绿色荧光，Ex=494 nm，Em=521 nm。使用流式细胞仪检测时可以采用FL1 detection channel。CFDA SE标记的细胞也可以用荧光显微镜进行观察。CFDA SE标记的细胞可用于体外和体内增殖研究，且都不会使邻近细胞染色[3]。

References:

[1] Azarsiz E, Karaca N, Ergun B, et al. In vitro T lymphocyte proliferation by carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester method is helpful in diagnosing and managing primary immunodeficiencies. J Clin Lab Anal. 2018;32(1):e22216.

[2] Lyons AB, Blake SJ, Doherty KV. Flow cytometric analysis of cell division by dilution of CFSE and related dyes. Curr Protoc Cytom. 2013;Chapter 9:Unit9.11.

[3] Li X, Dancausse H, Grijalva I, et al. Labeling Schwann cells with CFSE-an in vitro and in vivo study. J Neurosci Methods. 2003 May 30;125(1-2):83-91.