Phalloidin-Tetramethylrhodamine Conjugate

Phalloidin-Tetramethylrhodamine Conjugate是由荧光染料Tetramethylrhodamine（四甲基罗丹明）与鬼笔环肽（货号B7678）偶联的橙色鬼笔环肽荧光探针，用于标记丝状肌动蛋白（F-actin）。四甲基罗丹明提供橙色荧光（Ex / Em = 546/575 nm）。

Phalloidin（鬼笔环肽）是一种来源于毒蕈类鬼笔鹅膏（Amanita phalloides）的环状七肽毒素，以高亲和力（Kd= 20 nM）选择性地结合丝状肌动蛋白（F-actin），而不会与单体肌动蛋白（G-actin）结合[1]。肌动蛋白以两种形式存在，即单体和多聚体。肌动蛋白单体为球形，其表面上有一ATP结合位点。肌动蛋白单体一个接一个连成一串肌动蛋白链，两串这样的肌动蛋白链互相缠绕扭曲成一股微丝。这种肌动蛋白多聚体又被称为丝状肌动蛋白。鬼笔环肽与丝状肌动蛋白（微丝）的结合，阻止了微丝的解离，稳定了微丝结构[2]，破坏了微丝的聚合和解聚的动态平衡。

将荧光染料与鬼笔环肽进行偶联，偶联物常用在组织切片、固定细胞、透化的细胞和无细胞的实验中选择性地标记 F-actin，广泛应用于微丝骨架在细胞中的成像[3]。标记后的鬼笔环肽对大细丝和小细丝具有相似的亲和力，无论是动植物来源的肌肉细胞或非肌肉细胞，按照每一个肌动蛋白亚基约与一个鬼笔环肽分子的计量比结合。这种成像优于抗体染色：鬼笔环肽无物种限制，且几乎不存在非特异性染色，染色区和非染色区域对比极其明显。因此，鬼笔环肽衍生物特别适合替代肌动蛋白（Actin）抗体进行相关研究。由于它们不与单体 G-actin发生结合，这与某些抗肌动蛋白的抗体有所不同。

References:

[1] Estes JE, Selden LA, Gershman LC. Mechanism of action of phalloidin on the polymerization of muscle actin. Biochemistry. 1981 Feb 17;20(4):708-12.

[2] Oda T, Namba K, Maéda Y. Position and orientation of phalloidin in F-actin determined by X-ray fiber diffraction analysis. Biophys J. 2005;88(4):2727–2736.

[3] Melak M, Plessner M, Grosse R. Actin visualization at a glance. J Cell Sci. 2017 Feb 1;130(3):525-530.