产品上新|双荧光AO/PI细胞计数染色液全新上市
在细胞培养中,细胞计数是非常重要的,它可以反应细胞的活力状态,也可以用于确定实验用的细胞接种数量。传统的细胞计数大多是通过台盼蓝染色,其原理是台盼蓝可以进入死细胞,将死细胞染成蓝色,而活细胞不会被台盼蓝染色,从而区分活死细胞。这种方法可以计数培养的细胞系,但是对于一些复杂样本,如PMBC,全血细胞,含有较多杂质的原代细胞或状态比较差的细胞,计数效果不佳。这是因为台盼蓝特异性不强,也会将细胞碎片和PMBC中残留的红细胞计入总数。为了排除杂质、细胞碎片和红细胞的影响,越来越多的科学家选择使用细胞核染料(如AO、PI)代替台盼蓝进行细胞计数。
上新产品:AO/PI计数染色液
AO/PI染色液(AO/PI Staining Solution)中有两种DNA荧光染料:吖啶橙(AO)和碘化丙啶(PI)。AO能够穿透完整的细胞膜,嵌入所有细胞(包括活细胞和死细胞)的细胞核,发出绿色荧光;而PI只能穿透不完整的细胞膜,因此只能嵌入死细胞的细胞核,发出红色荧光。
本染色液经过优化,搭配带有荧光通道的细胞计数仪即可对细胞进行计数。相比于传统的台盼蓝染色,本染色液中的AO和PI都是DNA染料,这种特性可以有效排除杂质和红细胞的干扰,从而对样品进行准确计数。因此本产品非常适合原代细胞、PMBC、CHO等的细胞计数。
产品特点:
■ 即用型溶液:即开即用,无需另外配制;
■ 计数准确:相比于台盼蓝,AO/PI染色可排除细胞碎片、杂质等干扰,计数结果更可靠;
■ 应用广泛:可用于常规细胞系、PBMC、CHO、原代细胞、单细胞测序等的计数。
产品验证:
本产品用于高通量细胞计数仪计数细胞的效果图如下,可以快速准确的区分活细胞和死细胞。

图1:本产品用于细胞计数的示意图
AO/PI计数常见应用:
1) 细胞治疗
PBMC,即外周血单核细胞,是细胞治疗领域中的关键组成部分。PMBC可用于制备CAR-T细胞并用于癌症治疗。PMBC分离过程中经常会有红细胞的残留,而且红细胞的大小与PMBC接近。使用台盼蓝染色不能区分红细胞和活的PMBC,这极大阻碍了PMBC的精准计数,从而影响PMBC的使用。使用AO/PI染色计数则不会出现这个问题,只有含有细胞核的活细胞才会计入总数,计数结果更可靠。

图2:使用AO/PI对PMBC进行精准计数
(引自:J Immunol Methods. 2013 Feb 28;388(1-2):25-32.)
2) 生物制品制备
CHO细胞是生物制品(如抗体药物)制备中最常用的一种细胞。在CHO细胞发酵制备抗体药的过程中会产生很多细胞碎片,如果使用台盼蓝计数确定CHO细胞浓度,这些碎片也会被计入总数,使得结果偏离实际。而使用AO/PI染色计数则不会将细胞碎片计入在内。

图3:使用AO/PI对CHO细胞进行精准计数
(图引自网络)
细胞计数产品汇总:






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