慢性肾病（CKD）是全球范围内发病率和致残率极高的重大慢性疾病，其核心病理特征是肾脏间质纤维化，即细胞外基质（ECM）异常沉积，导致肾功能不可逆损伤。尽管肾纤维化已被公认为CKD进展的关键驱动力，但目前临床上尚无针对纤维化的有效治疗手段。传统药物多聚焦于控制高血压、糖尿病等基础病因，难以逆转已形成的纤维化。

近年来，嵌合抗原受体T细胞（CAR-T）疗法在肿瘤免疫治疗领域取得突破性进展，并逐步拓展至自身免疫、心血管等非肿瘤疾病。此前，针对成纤维细胞活化蛋白（FAP）的CAR-T细胞已被证实可缓解小鼠心脏纤维化，但其在肾脏等其他器官的应用受限，且存在潜在副作用。

近日，Cell Stem Cell杂志发表了山东大学团队最新研究，论文提出并验证了靶向肾脏ECM（细胞外基质）产生细胞的CAR-T细胞疗法，显著缓解了多种CKD模型的纤维化病理，为肾病及其心血管并发症的治疗带来全新思路。其中本文所用靶向ECM的PDGFRβ CAR mRNA由APExBIO定制合成。

期刊  Cell Stem Cell

IF值   20.4

DOI  10.1016/j.stem.2025.07.014

研究团队对DOCA/盐诱导的高血压性肾损伤小鼠肾脏进行单细胞RNA测序 (scRNA-seq)，识别出23个细胞亚群。通过ECM相关基因表达评分，发现成纤维细胞、周细胞和肌成纤维细胞是ECM的主要生产者，且成纤维细胞在高血压状态下贡献最大。进一步分析发现，血小板源性生长因子受体β（PDGFRβ）在上述三类ECM产生细胞中高特异性高表达，且几乎所有肌成纤维细胞均来源于PDGFRβ谱系。免疫荧光染色也证实了PDGFRβ在成纤维细胞（PDGFRα）、周细胞（NG2）和肌成纤维细胞（α-SMA）的高表达。因此，团队将PDGFRβ确定为之后抗纤维化CAR-T的靶点。

研究团队设计了针对小鼠PDGFRβ的二代CAR结构，转导小鼠脾源T细胞，流式细胞检测50-80%的T细胞能成功表达CAR（图2A）。体外实验显示，PDGFRβ CAR-T细胞对TGF-β预处理的肾间质成纤维细胞具有强烈杀伤活性，效果与FAP CAR-T相当（图2C）。随后在多种CKD模型（DOCA/盐诱导高血压、Ang II诱导、糖尿病肾病、单侧输尿管梗阻等）中进行验证，PDGFRβ CAR-T细胞过继治疗均显著改善肾功能（GFR、UACR、SCr、BUN），降低血压，减少肾脏及心脏主动脉纤维化。并且与FAP CAR-T相比，PDGFRβ CAR-T在肾脏和心脏血管周围纤维化的缓解上更具优势。

scRNA-seq和免疫荧光结果显示，PDGFRβ CAR-T治疗后，肾脏中成纤维细胞、周细胞和肌成纤维细胞比例显著下降（图3 A-B），肾实质细胞比例上升。转录组分析提示，ECM相关通路基因表达下调，而上调基因则富集于肾小管重吸收和代谢通路，免疫组化证实胶原I (COL1A1)、波形蛋白(vimentin)等纤维化标志物减少，提示肾功能得到恢复。

团队为实现小鼠体内T细胞原位转化为PDGFRβ CAR-T细胞，构建了CD5抗体修饰的脂质纳米颗粒（LNP）用于递送PDGFRβ CAR mRNA。体外细胞转染显示，相比使用IgG抗体作为对照修饰合成LNP，CD5修饰的LNP转染T细胞能高表达mPDGFRβ-CAR（图4B)。体内直接注射CD5/LNP-mPDGFRβ-CAR显示约6% 脾脏T细胞能被成功转化（图 4C）。在之后的治疗实验中证明使用LNP体内生成CAR-T细胞这种方式同样显著缓解CKD小鼠的肾脏、心脏、血管纤维化，且CAR-T细胞在体内持续时间有限，有助于降低潜在毒性。

最后团队构建了针对人PDGFRβ的CAR-T细胞，体外细胞验证其对表达PDGFRβ的HEK293T细胞具有特异杀伤活性。另外，在人多能干细胞(hPSC)来源的肾类器官CKD模型中进行验证，结果显示hPDGFRβ CAR-T细胞能有效减少胶原沉积，改善肾小管和足细胞损伤，且对正常肾类器官无明显毒性。