一方面，癌相关成纤维细胞（CAFs）过度激活（结缔组织生长因子（CTGF）是驱动CAFs活化和纤维化的关键分子），分泌大量胶原蛋白形成致密纤维化基质，阻碍免疫细胞浸润；另一方面，肿瘤细胞和CAFs高表达PD-L1，通过PD-1/PD-L1通路抑制细胞毒性CD8⁺T细胞功能。

作者为验证，从PDAC患者中分离成纤维细胞（CAFs），用重组结缔组织生长因子（CTGF）处理两天。通过RNA-seq分析，发现CTGF刺激会显著上调PD-L1表达，从而帮助胰腺癌的免疫逃避，并抑制T细胞活化通路。

随后，作者利用胰腺癌小鼠模型去评估α-CTGF治疗在体内的影响，以探究其在重塑免疫抑制性肿瘤微环境的能力。治疗后肿瘤负荷有所减少，且PD-L1的表达受到抑制，CD3、CD8T细胞增多。PD-1和TIM-3作为T细胞耗竭的典型标志物，同时高表达这两个标志物的T细胞比例降低，说明抗肿瘤能力增高。这些结果可以表明，抑制CTGF能够逆转胰腺癌中的免疫抑制性肿瘤微环境。

在体外实验中，证实Y126S同时高亲和力结合CTGF和PD-1。

在细胞层面，作者通过共培养模型验证Y126S的作用机制：将KPC小鼠来源的CAFs（KPC-CAFs）经小鼠CTGF（mCTGF）刺激后，与CD8⁺T细胞共培养，对比Y126S、IgG、抗PD-1等处理组的差异。

结果显示：mCTGF刺激使KPC-CAFs的PD-L1表达量显著升高，而Y126S处理可有效抑制这一上调。更重要的是，与IgG和抗PD-1组相比，Y126S处理显著降低CD8⁺T细胞中PD-1⁺TIM-3⁺耗竭细胞比例，减少T细胞凋亡，使细胞毒性显著增强。伴随这一变化，共培养体系中IL-2、IFN-γ、TNF-α等促炎细胞因子分泌量大幅提升，证实Y126S处理可通过下调PD-L1和解除T细胞耗竭，重建抗肿瘤免疫应答。

在原位PDAC模型中，将小鼠分为IgG对照组及Y126S低（4mg/kg）、中（8mg/kg）、高（16mg/kg）剂量组。IVIS成像显示Y126S的抗肿瘤活性呈剂量依赖性，中、高剂量组均能显著抑制肿瘤进展，使部分小鼠生存期延长至80天以上，且无明显体重下降，安全性良好，由于毒副作用，最终选择8mg/kg作为治疗剂量。

对比Y126S与抗CTGF、抗PD-1单药及两者联合治疗的效果。结果显示，Y126S组的肿瘤重量显著低于IgG组、抗CTGF组和抗PD-1组，且略优于联合治疗组。在KPC转基因小鼠模型中，⁶⁸Ga-DOTA-FAPIPET成像证实Y126S可显著降低肿瘤负荷，使小鼠生存期大幅延长，疗效远超单药及联合治疗。

通过形态学和物理特性检测，证实Y126S靶向CTGF可减少胶原沉积、抑制CAFs活化，打破纤维化屏障，为免疫细胞浸润扫清物理障碍。且Y126S组肿瘤组织的杨氏模量（反映硬度）明显低于对照组，说明纤维化基质的物理屏障被削弱。

胰腺癌肿瘤微环境的致密纤维化会阻碍药物渗透，而传统抗体常因靶向性不足导致肿瘤部位浓度低、正常组织毒性高。研究团队通过定量biodistribution实验对比Y126S与抗PD-1抗体的体内分布：给原位PDAC模型小鼠注射等效摩尔剂量的Y126S和抗PD-1抗体后，在不同时间点检测组织中抗体浓度。

结果显示：Y126S在肿瘤组织中的浓度显著高于抗PD-1抗体，且在所有检测时间点（0.5小时至48小时）均保持这一优势；更重要的是，Y126S在肿瘤中的浓度远高于肝、肺等正常器官，而抗PD-1抗体在肿瘤与正常组织中的分布无明显差异。这一发现解释了为何 Y126S在有效抑瘤的同时未引发明显毒性（如体重下降）该结果揭示了Y126S对CTGF的特异性结合，表明了Y126S在药物递送中的价值，为其安全性提供了实验依据。

研究者指出，Y126S为胰腺癌免疫治疗提供了全新范式，未来可能与化疗、放疗联合进一步提升疗效。目前，该抗体已进入临床前安全性评价阶段，有望早日开展临床试验，为胰腺癌患者带来新希望。