新品发布|无缝克隆试剂盒上新
新品发布New
无缝克隆试剂盒上新!
一、背景介绍
在分子生物学和遗传工程的领域,Gibson Assembly无缝克隆技术已经成为了一种革命性的工具,基于插入片段和线性化载体的末端同源重组的原理,允许以前所未有的精确度和效率进行DNA片段的组装,而不留下任何额外碱基序列,这种技术与传统的依赖限制性内切酶-连接酶的克隆方法不同,后者通常会在插入位点留下如限制酶切割位点等多余的序列。Gibson Assembly技术的应用范围广泛,从基因克隆、基因组编辑到合成生物学等多个领域都有其身影。它使得构建大型DNA分子、基因组和人工染色体变得更加简单和可行,为生物技术的发展开辟了新的道路。
二、技术原理
Gibson Assembly技术的核心在于利用三种酶:外切酶,DNA聚合酶和DNA连接酶,在同一反应体系中协同作用,实现DNA片段的精确组装。首先,外切酶识别并消化DNA片段的末端,形成具有黏性末端的单链DNA;随后,DNA聚合酶填补这些单链DNA的间隙,而连接酶则将这些DNA片段无缝连接起来。这一过程不仅高效,而且不需要额外的限制性酶切位点或连接子,极大地简化了实验步骤,减少了可能的错误。
三、产品介绍
Gibson Assembly无缝克隆试剂盒(货号: K1661)使用简便,试剂盒内已包含预混Gibson Assembly Mix,加入通过酶切或PCR的方法制备的线性化载体,以及通过PCR引入与载体克隆位点两端完全一致的15-25 bp的重叠序列的DNA插入片段即可进行重组反应,进行基因克隆时没有酶切位点的限制。

(货号: K1661)
操作简单:无需依赖传统限制性酶切操作
精确无缝:片段可插入质粒特定位置而不留下额外序列或标签
高效灵活:可以在一个反应中同时组装多个片段,最快仅需5分钟即可完成单片段重组
重组准确:组分经过改良,重组阳性率达95%以上
四、产品应用
- 基因编辑
- 合成生物学
- 蛋白质工程
- 疫苗开发
五、操作流程

1.设计:设计并合成具有适当重叠区域的DNA片段。
2.准备反应混合物:将DNA片段与Gibson Assembly Master Mix混合。
3.反应:在50°C下孵育一定时间(通常为1小时)。
4.转化:将反应产物转化到宿主细胞中,进行后续的筛选和分析
试用装活动
Gibson Assembly无缝克隆试剂盒(货号: K1661)可申请免费试用,请联系APExBIO对应区域销售进行试用装申请。
更多相关产品






沪公网安备 31011002003500