脱氧核糖核酸酶(DNase)和核糖核酸酶(RNase)是一类能够切断聚核苷酸链中磷酸二酯键的水解酶,从而降解DNA和RNA分子。由于它们具有极强的活性,即使是微量的DNase/RNase污染也可能对实验和生产工艺产生显著影响。在分子生物学和生物制药过程中,它们的存在可能会破坏基因组信息或干扰实验结果,从而导致数据丢失或实验失败。因此,在进行如 PCR、RT-PCR 等实验时,必须避免 DNase 和 RNase 的污染。核酸酶广泛存在于环境和实验仪器与设备表面上,各类反应缓冲液、逆转录酶和RNA聚合酶等分子生物试剂中同样存在DNase或RNase污染问题。
目前核酸水解凝胶电泳法、紫外分光光度计法、高效液相色谱法、电化学法和荧光探针法五种方法常被用于检测DNase和RNase的残留活性。核酸水解凝胶电泳法通过电泳分离降解的核酸片段,观察DNA或RNA的完整性,但这种方法受实验人员的主观判断影响较大;紫外分光光度计法通过测定供试溶液的吸光度来检测核酸酶活性,但不适合微量核酸酶残留的活性检测;电化学分析法和高效液相色谱法(HPLC)这两种方法都受限于仪器设备。相比之下,荧光探针法具有高灵敏度、快速检测能力,并且能够实现核酸酶活性的定量检测,因此被认为是检测核酸酶残留活性的最佳选择。
为满足上述需求,APExBIO经过严格的方法学验证,推出了基于荧光探针法的DNase和RNase活性检测试剂盒(产品信息如下表)。该试剂盒可用于检测环境、耗材、原料等是否存在DNase和RNase污染,从而有效防止DNase和RNase的残留,确保实验的准确性和产品的纯度与安全性。

检测原理
利用荧光探针技术检测DNase和RNase活性的过程,依赖于荧光标记的RNA和DNA底物。在没有RNase和DNase活性的环境中,底物保持稳定,荧光基团与淬灭基团紧密相邻,导致荧光信号无法被检测到。然而,一旦样品中存在RNase和DNase活性,底物便会被降解,荧光基团与淬灭基团之间的距离随之增加,从而释放出可被检测到的荧光信号。值得注意的是,荧光信号的强度与酶的浓度及其活性成正比,这使得荧光探针法成为一种灵敏且定量的活性检测方法。
验证数据
1. DNase活性检测验证数据

2. RNase活性检测验证数据
(1)适用于RNase A检测(Cat. No. K1902)
(2)适用于RNase A和RNase T1的检测(Cat. No. K1903)




沪公网安备 31011002003500