定义:
生物素-亲和素系统 (Biotin-avidin system,BAS)是一种起始于70年代后期、应用于免疫学的生物反应放大系统。其亲和常数(K=1015 mol/L)比抗原-抗体(K=105-1011 mol/L)至少高1万倍,是目前已知强度最高的非共价作用,同时得益于它的高度特异性、敏感性以及稳定性的特点,使得生物素标记的蛋白成为研究蛋白质相互作用和筛选抗体或小分子潜力药物的强大工具。
Avi标签是一个由15个氨基酸组成的短肽标签,BirA能够在ATP和生物素存在的条件下,将生物素连接到Avi标签的赖氨酸残基上,实现对目的蛋白的特定位点均一化生物素标记。生物素标记后的Avi标签蛋白,可以应用于多种生物学检测方法,如免疫荧光、原位杂交或流式细胞术、ELISA、SPR / BLI等,进行可视化和定量分析。
Biotin Labeling Kit for Avi-tag Protein (BirA)是一种利用生物素连接酶(BirA)对融合有Avi标签的蛋白或多肽进行生物素标记的工具。这种试剂盒能够高效且快捷地实现生物素标记,进而可以利用Streptavidin或Avidin进行目标蛋白的检测、纯化等实验步骤。
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图 1 Avi-tag蛋白生物素标记原理图
产品
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试剂盒组成:
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产品优势
标记特异性和均一性高:位点特异性和方向一致性
对蛋白活性影响小:标记位置在N-/C-末端和温和的反应条件
适用范围广:适用标记蛋白种类广以及标记后适用实验范围广
批间一致性高:能够获得高度一致的标记效果,确保实验结果的稳定性和可重复性
操作简便灵活:只需在反应体系中混合,无需复杂的化学合成或修饰步骤
操作流程
1) 搭配反应体系:按照下表配制一个反应体系:
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轻轻吹打混匀后,30℃孵育30分钟,带有Avi标签的蛋白或多肽即可完成生物素标记。
2) 生物素标记效率检测:如Western blot实验进行检测
3)生物素标记的蛋白或多肽纯化:如亲和素磁珠分离纯化生物素标记的蛋白或多肽。
验证数据
K4402 Biotin Labeling Kit for Avi-tag Protein (BirA)
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