定义：

GST标签蛋白纯化是基于谷胱甘肽S-转移酶（GST）与还原型谷胱甘肽（GSH）之间的高亲和力。GST标签通常被融合到目标蛋白的N端，利用GST与GSH的特异性结合，通过亲和层析纯化GST标签蛋白。GST融合蛋白表达系统具有能够高效表达目的蛋白、表达产物溶解性良好、产物易于分离纯化等特点。

分离和纯化的GST标签蛋白由于在纯化过程始终保持在温和的非变性条件下，得到的目的蛋白可以保持其自身的生物学活性，因此可以用于常规的结构和功能研究、抗体制备、以及蛋白与蛋白相互作用、蛋白与核酸相互作用等方面的研究。

产品：

试剂盒组成：

以K4201 GST-tag Protein Purification Kit为例

产品优势：

质量可靠：经过了严格的质量检测和验证，具有良好的性能和稳定性，能够保证实验结果的准确性和可重复性；

样本适用性广：适用于大肠杆菌、哺乳动物细胞、昆虫细胞及杆状病毒等其他表达系统中表达的GST标签重组蛋白；

高特异性：GST标签与固定化的谷胱甘肽之间具有高度特异性的亲和力，能够精准地结合带有GST标签的蛋白；

操作简便快捷：试剂盒提供了GST标签蛋白纯化所需的相关试剂；

高结合量：通常每毫升琼脂糖凝胶珠最大可结合5-6 mg GST；

操作流程：

1 准备10X GSH和洗脱缓冲液

2 样本处理：细菌沉淀添加裂解液并冰上超声破解，离心后取上清

3 GST-tag Purification Resin预处理：裂解液重悬并平衡凝胶后去上清

4 样本孵育结合：添加裂解菌液（Resin1:4-5mL菌液比例）后4℃摇床孵育1h

5 清洗：裂解液清洗5次，可保留每次留穿验证

6 洗脱：每次0.5mL洗脱蛋白6-10次获得洗脱液，即为纯化后的GST标签蛋白

7 后续处理：蛋白定量、SDS-PAGE等检测，也可-20~-70℃保存

验证数据：

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Reference：
Schäfer F, Seip N, Maertens B, Block H, Kubicek J. Purification of GST-Tagged Proteins. Methods Enzymol. 2015; 559:127-39. doi: 10.1016/bs.mie.2014.11.005. Epub 2015 May 16. PMID: 26096507.