抗体和单抗药物
抗体,也被称为免疫球蛋白(Ig),是一种由抗原进入机体刺激B细胞分化增殖为浆细胞而合成并分泌的一类能与相应抗原发生特异性结合并产生免疫效应的含有糖基的球蛋白。
单克隆抗体药物(可简称为单抗药物)是一类革命性的生物治疗药物,它们通过模仿免疫系统中的抗体蛋白质来识别和攻击特定的外来入侵者,如癌细胞。单抗药物本质上也是抗体的一种,一般分为治疗疾病(尤其是肿瘤)的单抗药剂、抗肿瘤单抗偶联物、治疗其他疾病的单抗。单抗药剂针对的靶点通常为细胞表面的疾病相关抗原或特定的受体。
与科研抗体相比,单克隆抗体药物是经过严格筛选、优化并用于临床治疗的抗体,而科研抗体通常用于实验室研究,以探索生物学机制或疾病诊断,它们在纯度、稳定性和批量生产方面可能与药物级别的单克隆抗体有所不同。
抗体抑制剂(Inhibitory Antibodies)是一类与原始治疗性抗体药物具有相同活性生物成分的研究级抗体,具有体内活性,能通过阻断或中和靶蛋白等达到一定的生理功能,常被用于作为阳性对照用于药物效果评价、辅佐验证靶点蛋白的功能活性等研究中。

单克隆抗体
抗体的结构和组成
完整抗体结构包括2条重链和2条轻链,各链包括恒定区C和可变区V。根据重链恒定区抗原性的差异可分为γ、α、μ、δ和ε五类,对应 IgG、IgA、IgM、IgD和IgE五种抗体,而依据重链恒定区内的铰链区氨基酸组成和重链二硫键位置和数目不同,可分为不同抗体亚型,如IgG分为gG1、IgG2、IgG3和IgG4,在血清中的分布丰度分别为60%、25%、10%、5%。根据轻链恒定区差异,抗体又可分为有κ(Kappa)和λ(Lambda)两种,同时根据λ链恒定区个别氨基酸的差异,又可分为λ1、λ2、λ3、λ4四个亚型,κ链和λ链功能上没有差异。
IgG按功能可分为Fab区和Fc区域,Fab是由可变区轻链/重链、恒定区轻链/恒定区重链1段组成的混合轻重链二聚体,Fc区是由恒定区重链2和恒定区重链3片段组成的重链二聚体。Fab区域决定了抗体对其靶标抗原的特异性和亲和力。Fc区可以主动补充或结合在免疫效应细胞表面Fc受体(FcγR),从而发挥抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(ADCC)、补体依赖性细胞毒性(CDC)和抗体依赖性细胞吞噬作用(ADCP)等抗体效应功能。

人抗体类和亚类的多肽链结构
分类
1. 传统单克隆抗体(-omab)
2. 人鼠嵌合抗体(-ximab)
3. 人源化抗体(-zumab)
4. 全人源抗体(-umab)
5. 抗体偶联药物(ADCs)
6. 双特异性抗体(BsAb)等

单克隆抗体结构和分类
应用领域
- 信号通路研究:解析细胞内信号传导机制
- 疾病模型研究:研究疾病发病机制
- 药物开发:作为潜在的治疗药物或药物开发工具
作用机制
- 拮抗作用:mAbs通过结合特定的抗原表位,能够有效地阻断其生物学活性,从而发挥拮抗作用。
- 与受体结合的信号传导作用:通过与细胞表面受体结合,影响信号传导途径,从而影响细胞功能。
- 补体依赖性细胞毒作用(CDC):通过与抗原结合,激活补体系统,形成膜攻击复合物,导致靶细胞裂解,这种机制是mAbs治疗肿瘤和自身免疫性疾病的重要途径之一。
- 抗体依赖性细胞毒作用(ADCC):通过其Fc段与免疫效应细胞(如NK细胞、巨噬细胞)表面的Fc受体结合,激活这些细胞,介导抗体依赖性细胞毒作用,从而杀伤靶细胞。

单抗药物的主要作用机制
产品使用
01 使用前处理:
开盖前,13,000 rpm离心20-30 s使附于管盖或管壁的抗体收集于管底。
02 查询工作浓度:
体内处理 In vivo(以Bevacizumab在小鼠内使用)
进入Google学术搜索"Bevacizumab" AND "mouse"

进入文献并仔细查询获得体内实验所需的参考浓度和处理方式:1,5,10,15mg/kg,腹腔注射(intraperitoneal (IP) injections)

体外处理In vitro(以Bevacizumab在HUVECs细胞内使用为例)
进入Google学术搜索"Bevacizumab" AND "HUVECs";

进入仔细查询文献内容获得细胞实验所需的参考浓度和方式:用培养基连续稀释贝伐单抗原液,得到0.25、1.0、2.0、3.0、4.0和5.0 mg/mL的浓度。

03 配置试剂:
按照参考浓度进行工作液配置。
(注:若没有参考浓度建议进行梯度预实验获取合适的工作液浓度)
产品(热门靶点示意)

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