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Protease Inhibitor Cocktail(EDTA-Free,100X in DMSO)

 
Catalog No.
K1007
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相当于Sigma P8340，用于细胞、组织提取物，增加蛋白稳定性。
组合的产品项目
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电话: 021-55669583

邮箱: sales@apexbio.cn

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B

文献引用

Description

在平衡状态下内源性蛋白质产生并降解，因此在稳定的环境条件下其细胞水平是稳定的。粗细胞提取物含有许多能够降解提取物中的蛋白质的内源酶，例如磷酸酶和蛋白酶。当在体外从细胞和组织中提取蛋白质时，蛋白质产生被显著抑制，降解增加。提高完整蛋白质产量的最佳方法是加入已知存在的那些酶的抑制剂。

蛋白酶抑制剂cocktail用于细胞裂解物或组织提取物以提高蛋白质的稳定性。该cocktail起到抑制蛋白酶的作用，这种蛋白酶会降解非磷酸化或磷酸化蛋白质底物。

该蛋白酶抑制剂cocktail包含单个组分，包括对半胱氨酸，丝氨酸，酸性蛋白酶和氨基肽酶具有广泛特异性的AEBSF，Aprotinin，Bestatin，E-64，Leupeptin 和 Pepstatin A。已经用哺乳动物细胞和组织提取物对这种蛋白酶抑制剂cocktail进行了优化和测试。该蛋白酶抑制剂cocktail作为DMSO即用溶液提供。

质量控制

质量控制和DataSheet

批次:

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试验操作

在室温下解冻，然后在实验前以1:100（v / v）稀释至溶液样品（如细胞裂解物或组织提取物）。

应用：WB，Co-IP，pull-down，IF，IHC，kinase assay等。

Components and Storage

Catalog No. Product Name Summary Targets CAS Number Smiles
A2573 AEBSF.HCl 丝氨酸蛋白酶抑制剂 Proteases|Serine Protease 30827-99-7 C1=CC(=CC=C1CCN)S(=O)(=O)F.Cl
A2574 Aprotinin 牛胰蛋白酶抑制剂 Proteases|Serine Protease 9087-70-1
A2575 Bestatin 氨肽酶抑制剂 Proteases|Aminopeptidase 58970-76-6 CC(C)CC(C(=O)O)NC(=O)C(C(CC1=CC=CC=C1)N)O
A2576 E-64 半胱氨酸蛋白酶（cysteine protease）抑制剂 Proteases|Cathepsin 66701-25-5 CC(C)CC(C(=O)NCCCCN=C(N)N)NC(=O)C1C(O1)C(=O)O
A2570 Leupeptin 丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶抑制剂 Proteases|Serine Protease 103476-89-7 O=C(C(C([H])([H])C(C([H])([H])[H])([H])C([H])([H])[H])([H])N([H])C(C([H])([H])[H])=O)N([H])C(C(N([H])C(C([H])=O)([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])/N=C(N([H])[H])/N([H])[H])=O)([H])C([H])([H])C(C([H])([H])[H])([H])C([H])([H])[H]
A2571 Pepstatin A 天冬氨酸蛋白酶抑制剂 Proteases|Other Proteases 26305-03-3 CC(C)CC(C(CC(=O)O)O)NC(=O)C(C)NC(=O)CC(C(CC(C)C)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)CC(C)C)O
-20°C条件下储存，稳定12个月以上。

常见问题解答 (FAQs)

1）Q：实验中经常用PMSF来保护蛋白，蛋白酶抑制剂Cocktail和它比有什么优势？

A：PMSF只能抑制一种蛋白酶（丝氨酸蛋白酶），Cocktail抑制的更全面且更加持久；此外，PMSF毒性较高并且PMSF更容易降解失效。

2）Q：抑制剂Cocktail可以反复冻融吗？

A：可以反复冻融，但是尽量减少反复冻融的次数。

3）Q：应该选择片剂的Cocktail还是溶液型Cocktail？

A：两种类型的产品都含有添加物，片剂中含有若干种公司专利的未经公开的医药成分，而溶液型产品中含有溶剂成分DMSO。一般来说这些添加物是不会影响产品效果的。溶液型需要的加工步骤少，因而质量好价格低。而片剂产品在储存和运输两个环节具有优势。（片剂能够在4°C储存而不需要-20°C）。

4）Q：用了Cocktail，蛋白仍然降解是怎么回事？

A：蛋白酶抑制剂Cocktail作用是保护蛋白免受蛋白酶降解，提高蛋白得率。对于绝大多数蛋白，Cocktail都有很好的效果。如果还是出现蛋白得率低的情况，可检查实验操作步骤和设计，减少导致蛋白降解的环节。例如，细胞处理前，先要将Cocktail加入到裂解液中并混匀，收集完细胞后立即加入准备好的裂解液。