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UNC1999

现货
Catalog No.
B1583
EZH2抑制剂
组合的产品项目
规格价格库存 数量
10mM (in 1mL DMSO)
¥ 850.00
现货
5mg
¥ 680.00
现货
25mg
¥ 2,200.00
现货

电话: 021-55669583

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Background

UNC1999 is a potent, orally bioavailable and selective inhibitor of EZH2 and EZH1 with IC50 of 2 nM and 45 nM in cell-free assays, respectively.

UNC1999 binds to the EZH2 SAM binding site of EZH2 and competes with the cofactor SAM with a Ki of 4.6nM. It does not compete with the H3 peptide substrate. UNC1999 also has potency for mutant EZH2, including Y641N and Y641F mutants. Besides EZH2, UNC1999 is effective for EZH1 with IC50 value of 45nM. UNC1999 is shown to be more than 200-fold selective for EZH2 over a broad range of non-epigenetic targets, including kinases, GPCRs, transporters and ion channels [1].

EZH2 catalyzes methylation of H3K27, producing H3K27me3. H3K27me3 is a transcriptionally repressive post-translational modification. As an inhibitor of EZH2, UNC1999 reduces H3K27me3 with IC50 value of 124nM in the In-Cell Western assay. Additionally, UNC1999 can inhibit cell proliferation in a DLBCL cell line harboring the Y641N mutant with EC50 value of 633nM. Moreover, UNC1999 is reported to be orally bioavailable in mice [1].

References:
[1] Konze KD, Ma A, Li F, Barsyte-Lovejoy D, Parton T, Macnevin CJ, Liu F, Gao C, Huang XP, Kuznetsova E, Rougie M, Jiang A, Pattenden SG, Norris JL, James LI, Roth BL, Brown PJ, Frye SV, Arrowsmith CH, Hahn KM, Wang GG, Vedadi M, Jin J. An orally bioavailable chemical probe of the Lysine Methyltransferases EZH2 and EZH1. ACS Chem Biol. 2013;8(6):1324-34.

文献引用

1. Li N, Yang L, et al. "BET bromodomain inhibitor JQ1 preferentially suppresses EBV-positive nasopharyngeal carcinoma cells partially through repressing c-Myc." Cell Death Dis. 2018 Jul 9;9(7):761. PMID:29988031
2. Lin B, Coleman JH, et al. "Injury Induces Endogenous Reprogramming and Dedifferentiation of Neuronal Progenitors to Multipotency." Cell Stem Cell. 2017 Nov 20. pii: S1934-5909(17)30375-2. PMID:29174332

Chemical Properties

Physical AppearanceA solid
StorageStore at -20°C
M.Wt569.74
Cas No.1431612-23-5
FormulaC33H43N7O2
Solubility≥28.5mg/mL in DMSO
Chemical NameN-[(6-methyl-2-oxo-4-propyl-1H-pyridin-3-yl)methyl]-1-propan-2-yl-6-[6-(4-propan-2-ylpiperazin-1-yl)pyridin-3-yl]indazole-4-carboxamide
SDFDownload SDF
Canonical SMILESCCCC1=C(C(=O)NC(=C1)C)CNC(=O)C2=C3C=NN(C3=CC(=C2)C4=CN=C(C=C4)N5CCN(CC5)C(C)C)C(C)C
运输条件试用装:蓝冰运输。 其他可选规格:常温运输或根据您的要求用蓝冰运输。
一般建议为了使其更好的溶解,请用37℃加热试管并在超声波水浴中震动片刻。不同厂家不同批次产品溶解度各有差异,仅做参考。若实验所需浓度过大至产品溶解极限,请添加助溶剂助溶或自行调整浓度。

试验操作

激酶实验 [1]:

临近闪烁分析法

甲基转移酶活性测定通过使用闪烁亲近测定法(SPA)监测从S-腺苷甲硫氨酸(3H-SAM)到生物素化肽底物的氚标记甲基的掺入来进行,用于PRC2-EZH2三聚体复合物(EZH2:EED:SUZ12),PRC2-EZH1五聚体复合物(EZH1:EED:SUZ12:RBBP4:AEBP2),SETD7,G9a,GLP,SETDB1,SETD8,SUV420H1,SUV420H2,SUV39H2,MLL1四聚体复合物(MLL:WDR5:RbBP5:ASH2L),PRMT1,PRMT3,PRMT5-MEP50复合体和SMYD2。 SMYD2和SMYD3的反应缓冲液是50mM Tris pH 9.0,5mM DTT,0.01%TritonX-100;对于G9a,GLP和SUV39H2是25mM磷酸钾pH 8.0,1mM EDTA,2mM MgCl 2和0.01%Triton X-100;对于其它HMT为 20mM Tris pH 8.0,5mM DTT,0.01%TritonX-100。为了停止酶反应,加入10μL 7.5M盐酸胍,随后加入180μL缓冲液,混合并转移至384孔新板。混合后,将反应混合物温育,并使用Topcount板读数器测量CPM计数。对于每个数据集,在不存在化合物的情况下的CPM计数被定义为100%活性。在不存在酶的情况下,将每个数据集中的CPM计数定义为背景(0%)。使用100nM至100μM的化合物浓度测定IC50值。使用SigmaPlot软件测定IC 50值。使用在20mM Tris pH 8,5mM DTT,0.01%Triton X-100,5μM SAM和1μM H3(1-24)肽(与野生型PRC2-EZH2复合体相同)中的30nM酶进行EZH2-Y641F测定。对于DNMT1,使用半甲基化dsDNA作为底物进行测定。通过退火由Eurofins MWG Operon合成的两条互补链(生物掺杂的正向链:BGAGCCCGTAAGCCCGTTCAGGTCG和反向链:CGACCTGAACGGGCTTACGGGCTC)来制备dsDNA底物。反应缓冲液是20mM Tris-HCl,pH8.0,5mM DTT,0.01%Triton X-100。使用过滤板进行DOT1L的甲基转移酶活性测定。将在20mM Tris-HCl,pH 8.0, 5mM DTT,2mM MgCl2和0.01%Triton X-100中的反应混合物在室温下温育1小时,加入100μL10%TCA,混合并转移至过滤板。将平板以2000rpm离心2分钟,然后另外2次10%TCA洗涤和一次乙醇洗涤(180μL),随后离心。将板干燥并加入100 μL MicroO并离心。加入70μL MicroO并且使用Topcount读板器测量CPM。

细胞实验 [1]:

细胞系

MCF10A细胞,弥漫性大B细胞淋巴瘤细胞系

溶解方法

该化合物在DMSO中的溶解度> 10 mM。若配制更高浓度的溶液,一般步骤如下:请将试管置于37℃加热10分钟和/或将其置于超声波浴中震荡一段时间。原液于-20℃可放置数月。

反应时间

100nM-5μM处理2-8天

应用

UNC1999浓度依赖性降低MCF10A细胞中的H3K27me3水平,并选择性杀死含有EZH2Y641N突变体的弥漫性大B细胞淋巴瘤细胞系。

动物实验 [1]:

动物模型

雄性瑞士白化老鼠模型

剂量

15、50或150mg / kg,腹膜内注射或口服给药24小时

应用

UNC1999是可口服的、生物医学研究团体评估小鼠的长期治疗益处和潜在毒性的有用工具。 而且,UNC1999(150mg / kg,腹膜内注射)在所有测试小鼠中耐受性良好。

注意事项

请于室内测试所有化合物的溶解度。实际溶解度和理论值可能略有不同,这是由实验系统的误差引起的,属于正常现象。

References:

1Konze, K. D., Ma, A., Li, F., Barsyte-Lovejoy, D., Parton, T., Macnevin, C. J., Liu, F., Gao, C., Huang, X. P., Kuznetsova, E., Rougie, M., Jiang, A., Pattenden, S. G., Norris, J. L., James, L. I., Roth, B. L., Brown, P. J., Frye, S. V., Arrowsmith, C. H., Hahn, K. M., Wang, G. G., Vedadi, M. and Jin, J. (2013) An orally bioavailable chemical probe of the Lysine Methyltransferases EZH2 and EZH1. ACS Chem Biol. 8, 1324-1334

生物活性

描述 UNC1999是一种强效的和口服有效的EZH2和EZH1选择性抑制剂,IC50值分别为2 nM和45 nM。
靶点 EZH2 EZH1        
IC50 2 nM 45 nM        

质量控制

化学结构

UNC1999

相关生物数据

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