Torin 2

mTOR 和 PI3K 细胞试验

使用p53-/- MEFs确定mTOR的细胞IC50值。 用载体或递增浓度的Torin 2处理细胞1小时，然后裂解。通过使用磷酸特异性抗体的免疫印迹检测S6K1 Thr-389的磷酸化。 同时，PI3Kα的细胞IC50值基于表达Akt1 S473D突变体的人PC3细胞或p53-/- / mLST8-/- MEF中Akt Thr-308的磷酸化来确定。

细胞系

人髓甲状腺癌（MTC）细胞系（MZ-CRC-1和TT细胞）

溶解方法

该化合物在DMSO中的溶解度> 10 mM。若配制更高浓度的溶液，一般步骤如下：请将试管置于37℃加热10分钟和/或将其置于超声波浴中震荡一段时间。原液于-20℃可放置数月。

反应时间

50nM，100nM; 3天或5天;

应用

Torin2抑制细胞mTOR活性的EC50值为0.25nM，同时保持比PI3K和大多数其它蛋白激酶的抑制高800倍的细胞选择性 [1]。 此外，Torin2显著降低MZ-CRC-1和TT细胞的活力和迁移 [2]。

动物模型

雄性C57BL / 6小鼠模型; 雌性裸鼠模型

剂量

20 mg/kg、口服灌胃、6小时; 或2mg/kg腹膜内注射、每周两次、持续5周

应用

Torin2（20 mg/kg）显示良好的生物利用度和暴露量，并且保持至少6小时的强抑制肺和肝中mTOR活性 [1]。 此外，Torin2和顺铂的组合使用协同抑制裸鼠的肿瘤生长 [3]。

注意事项

请于室内测试所有化合物的溶解度。实际溶解度和理论值可能略有不同，这是由实验系统的误差引起的，属于正常现象。

References:

1Liu, Q., Wang, J., Kang, S. A., Thoreen, C. C., Hur, W., Ahmed, T., Sabatini, D. M. and Gray, N. S. (2011) Discovery of 9-(6-aminopyridin-3-yl)-1-(3-(trifluoromethyl)phenyl)benzo[h][1,6]naphthyridin-2( 1H)-one (Torin2) as a potent, selective, and orally available mammalian target of rapamycin (mTOR) inhibitor for treatment of cancer. J Med Chem. 54, 1473-1480

2Tamburrino, A., Molinolo, A. A., Salerno, P., Chernock, R. D., Raffeld, M., Xi, L., Gutkind, J. S., Moley, J. F., Wells, S. A., Jr. and Santoro, M. (2012) Activation of the mTOR pathway in primary medullary thyroid carcinoma and lymph node metastases. Clin Cancer Res. 18, 3532-3540

3Hussain, A. R., Al-Romaizan, M., Ahmed, M., Thangavel, S., Al-Dayel, F., Beg, S., Uddin, S., Siraj, A. K. and Al-Kuraya, K. S. (2015) Dual Targeting of mTOR Activity with Torin2 Potentiates Anticancer Effects of Cisplatin in Epithelial Ovarian Cancer. Mol Med. 21, 466-478