THZ531
mRNA synthesis
In vitro transcription of capped mRNA with modified nucleotides and Poly(A) tail
Tyramide Signal Amplification (TSA)
TSA (Tyramide Signal Amplification), used for signal amplification of ISH, IHC and IC etc.
Phos Binding Reagent Acrylamide
Separation of phosphorylated and non-phosphorylated proteins without phospho-specific antibody
Cell Counting Kit-8 (CCK-8)
A convenient and sensitive way for cell proliferation assay and cytotoxicity assay
SYBR Safe DNA Gel Stain
Safe and sensitive stain for visualization of DNA or RNA in agarose or acrylamide gels.
Inhibitor Cocktails
Protect the integrity of proteins from multiple proteases and phosphatases for different applications.
THZ531是首个CDK12和CDK13的共价抑制剂,IC50值分别为158 nM和69 nM[1]。
包含CDK12和CDK13的复合物调节转录延伸和加工,包括mRNA剪切和3’-端RNA加工。CDK12和CDK13的缺失,或者他们的辅因子细胞周期蛋白K的缺失可阻碍Pol II持续合成和RNA加工[1]。
THZ531是一种不可逆的CDK12和CDK13共价抑制剂。THZ531有效抑制CDK12和CDK13的IC50值分别为158 nM和69 nM,而抑制CDK7和CDK9的效力要弱50倍以上,IC50值分别为8.5 μM和10.5 μM。在Jurkat细胞中,THZ531可逆地减少细胞增值,IC50值为50 nM。THZ531以剂量和时间依赖的方式诱导细胞凋亡。THZ531也减少Pol II C端结构域(Pol II)的Ser2磷酸化,其是活性转录延伸的标志,从而导致关键超增强子相关的转录因子基因和DNA损伤响应(DDR)基因表达的失活[1]。
Reference:
1.Zhang T, Kwiatkowski N, Olson CM, et al. Covalent targeting of remote cysteine residues to develop CDK12 and CDK13 inhibitors. Nat Chem Biol. 2016 Oct;12(10):876-84.
- 1. Peuget S, Zhu J, et al. "Thermal proteome profiling identifies oxidative-dependent inhibition of the transcription of major oncogenes as a new therapeutic mechanism for select anticancer compounds." Cancer Res. 2020;canres.2069.2019. PMID:32019870
- 2. Wang C, Vegna S, et al. "Inducing and exploiting vulnerabilities for the treatment of liver cancer." Nature. 2019 Oct 2. PMID:31578521
- 3. Wang C, Wang H, et al. "CDK12 inhibition mediates DNA damage and is synergistic with sorafenib treatment in hepatocellular carcinoma." Gut. 2019 Sep 13. pii: gutjnl-2019-318506. PMID:31519701
Physical Appearance | A solid |
Storage | Store at -20°C |
M.Wt | 558.07 |
Cas No. | 1702809-17-3 |
Formula | C30H32ClN7O2 |
Solubility | ≥55.8 mg/mL in DMSO; insoluble in H2O; ≥4.9 mg/mL in EtOH |
Chemical Name | (R,E)-N-(4-(3-((5-chloro-4-(1H-indol-3-yl)pyrimidin-2-yl)amino)piperidine-1-carbonyl)phenyl)-4-(dimethylamino)but-2-enamide |
SDF | Download SDF |
Canonical SMILES | ClC1=CN=C(N[C@H]2CN(C(C3=CC=C(NC(/C=C/CN(C)C)=O)C=C3)=O)CCC2)N=C1C4=CNC5=C4C=CC=C5 |
运输条件 | 蓝冰运输或根据您的需求运输。 |
一般建议 | 不同厂家不同批次产品溶解度各有差异,仅做参考。若实验所需浓度过大至产品溶解极限,请添加助溶剂助溶或自行调整浓度。溶液形式一般不宜长期储存,请尽快用完。 |
激酶实验 [1]: | |
激酶实验 |
使用0.2 μM CDK–cyclin复合物进行放射性激酶活性测定。通常,在含有0.2 μM活性激酶的35 μl反应体积在激酶缓冲液中平衡,激酶缓冲液包含40 mM Hepes(pH 7.6)、34 mM NaCl、34 mM KCl、10 mM MgCl2、5%甘油和1×PhosSTOP。加入预冷的ATP至终浓度为200 μM和3μCi[γ-32P] ATP和50 μM含有5个磷酸化位点的底物肽,并将反应混合物在30℃、350 rpm的恒温混合器中温育30分钟。通过加入终浓度为50 mM的EDTA来终止反应。使用Optitran BA-S85增强膜将各15 μl的样点等分到纸方块上。用0.75%(v/v)磷酸将纸方块洗涤3次,持续5分钟,每个纸方块至少使用5 ml洗涤溶液。在Beckman扫描计数器(Beckman Coulter)中计数放射性1分钟。将化合物THZ531以不同浓度加入到0.2 μM CDK–cyclin复合物中,并在30℃和350 rpm下孵育1至540分钟,然后将ATP和底物加入到反应混合物中。 |
细胞实验[1]: | |
细胞系 |
Jurkat细胞 |
溶解方法 |
该化合物可溶于DMSO。若获取更高浓度的溶液,可在37℃下孵育10分钟,随后在超声波浴中摇匀。-20℃以下可储存数月。 |
反应条件 |
50-1200 nM,6 h |
应用 |
THZ531导致Jurkat细胞增殖的显著和不可逆的降低,IC50为50 nM。THZ531以剂量依赖性和时间依赖性方式增加亚G1期细胞含量。高剂量的THZ531造成明显的膜联蛋白V信号,72小时引发30-40%的膜联蛋白V染色细胞。THZ531选择性降低Ser2磷酸化水平,而对CTD pSer5或pSer7水平无明显影响。50 nM THZ531引起一小部分基因的表达丧失。 |
注意事项 |
由于实验环境的不同,实际溶解度可能与理论值略有不同,请测试室内所有化合物的溶解度。 |
References: [1]. Zhang T, Kwiatkowski N, Olson C M, et al. Covalent targeting of remote cysteine residues to develop CDK12 and CDK13 inhibitors[J]. Nature chemical biology, 2016. |
质量控制和MSDS
- 批次: