PF-670462
mRNA synthesis
In vitro transcription of capped mRNA with modified nucleotides and Poly(A) tail
Tyramide Signal Amplification (TSA)
TSA (Tyramide Signal Amplification), used for signal amplification of ISH, IHC and IC etc.
Phos Binding Reagent Acrylamide
Separation of phosphorylated and non-phosphorylated proteins without phospho-specific antibody
Cell Counting Kit-8 (CCK-8)
A convenient and sensitive way for cell proliferation assay and cytotoxicity assay
SYBR Safe DNA Gel Stain
Safe and sensitive stain for visualization of DNA or RNA in agarose or acrylamide gels.
Inhibitor Cocktails
Protect the integrity of proteins from multiple proteases and phosphatases for different applications.
PF-670462 是一种有效的和选择性的CK1ε及CK1δ抑制剂,IC50 值分别为80 nM 和13 nM [ 1 ] 。
CK1ε及CK1δ属于酪蛋白激酶1 家族,是丝氨酸/苏氨酸选择性酶,在调节昼夜节律中发挥重要作用[ 1 ]。
在GFP 标记的PER3 与人CK1ε酶共转染的COS-7 细胞中,PF-670462 浓度依赖性地抑制PER3 的核易位[2]。在从WT小鼠获得的原发性肺成纤维细胞中,PF-670462剂量依赖性地显著延长昼夜节律周期。用1 μM 剂量,WT 成纤维细胞中的周期延长至33 h [ 3 ] 。
在WT、Ck1ε/及 Ck1εtau小鼠中,PF-670462 (10 mg/kg/d)在所有三个基因型中显著地延长活动节律的周期(WT:0.44 h 、Ck1εtau:0.39 h 、Ck1ε/:0.42 h)。在WT 小鼠中,活动开始在24 d 治疗后10.4 h发生 。此外,PF-670462 在WT 和Ck1ε/小鼠中引起相同的周期延长,这表明了CK1δ对昼夜节律周期的效果[ 3 ]。
参考文献:
[1]. Walton KM, Fisher K, Rubitski D, et al. Selective inhibition of casein kinase 1 epsilon minimally alters circadian clock period. J Pharmacol Exp Ther, 2009, 330(2): 430-439.
[2]. Badura L, Swanson T, Adamowicz W, et al. An inhibitor of casein kinase I epsilon induces phase delays in circadian rhythms under free-running and entrained conditions. J Pharmacol Exp Ther, 2007, 322(2): 730-738.
[3]. Meng QJ, Maywood ES, Bechtold DA, et al. Entrainment of disrupted circadian behavior through inhibition of casein kinase 1 (CK1) enzymes. Proc Natl Acad Sci U S A, 2010, 107(34): 15240-15245
.Physical Appearance | A solid |
Storage | Store at -20°C |
M.Wt | 410.32 |
Cas No. | 950912-80-8 |
Formula | C19H22Cl2FN5 |
Synonyms | PF 670462;PF670462 |
Solubility | ≥20.5 mg/mL in DMSO; ≥20.8 mg/mL in EtOH with gentle warming and ultrasonic; ≥94 mg/mL in H2O with gentle warming and ultrasonic |
Chemical Name | 4-[3-cyclohexyl-5-(4-fluorophenyl)imidazol-4-yl]pyrimidin-2-amine;dihydrochloride |
SDF | Download SDF |
Canonical SMILES | C1CCC(CC1)N2C=NC(=C2C3=NC(=NC=C3)N)C4=CC=C(C=C4)F.Cl.Cl |
运输条件 | 蓝冰运输或根据您的需求运输。 |
一般建议 | 不同厂家不同批次产品溶解度各有差异,仅做参考。若实验所需浓度过大至产品溶解极限,请添加助溶剂助溶或自行调整浓度。溶液形式一般不宜长期储存,请尽快用完。 |
激酶实验 [1]: | |
激酶实验 |
在含50 mM Tris,pH 7.5,10 mM MgCl2,1 mM DTT,10 μM ATP和42 μM多肽底物 (PLSRTLpSVASLPGL) 的20 μL缓冲液中进行CK1ε和CK1δ激酶测定。CK1ε和CK1δ的最终酶浓度分别为2.5 nM和2 nM。加入1 μL CK1抑制剂或5% DMSO,再将反应物置于室温下孵育2小时,最后加入20 μL Kinase-Glo Plus Assay试剂进行测定。在Envision读板器上,使用Enhanced Lum检测器测定荧光。 |
Cell experiment [1]: | |
细胞系 |
Rat1细胞 |
制备方法 |
在DMSO中的溶解度大于20.5 mg/mL。若配制更高浓度的溶液,一般步骤如下:请将试管置于37 °C加热10分钟和/或将其置于超声波浴中震荡一段时间。原液于-20 °C可放置数月。 |
反应条件 |
0 ~ 50 μM |
实验结果 |
在Rat1细胞中,PF-670462显著延长昼夜节律。在浓度低至1 μM时,PF-670462开始呈剂量依赖性地显著延长昼夜节律。PF-670462在全细胞CK1δ IC50值的3 ~ 10倍的浓度下开始延长时钟周期。此外,在Rat1细胞中,PF-670462在低于CK1ε IC50值3倍的浓度下起效。 |
动物实验 [1]: | |
动物模型 |
C57BL/6J小鼠 |
给药剂量 |
32 mg/kg;皮下注射;单次给药 |
实验结果 |
单次皮下注射32 mg/kg PF-670462,PF-670462的脑-血浆浓度比于24小时内保持一致,其平均值为1.3。脑内游离PF-670462的Cmax值高于PF-670462在细胞中对CK1δ IC50值的3倍,而且,相当于PF-670462在细胞中对CK1ε IC50值的0.7倍。上述结果表明PF-670462抑制大部分CK1δ和CK1ε活性。 |
注意事项 |
请于室内测试所有化合物的溶解度。虽然化合物的实际溶解度可能与其理论值略有不同,但仍处于实验系统误差的允许范围内。 |
References: [1]. Walton KM, Fisher K, Rubitski D, et al. Selective inhibition of casein kinase 1 epsilon minimally alters circadian clock period. J Pharmacol Exp Ther, 2009, 330(2): 430-439. |
质量控制和MSDS
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