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NHS-Biotin

 
Catalog No.
A8002
生物素化试剂
组合的产品项目
规格价格库存 数量
100mg
¥ 336.00
现货

电话: 021-55669583

邮箱: sales@apexbio.cn

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A

背景

NHS-Biotin (C14H18O5N3S)是一个N-羟基琥珀酰亚胺生物素,是三个类似的EZ-Link NHS-Biotin试剂中最短的一个,它能够简单、有效地将溶液中的抗体、蛋白和任何其它含有伯胺的生物分子进行生物素化。NHS-Biotin为研究人员提供了标记和检测的可能性,其中生物素结合的空间位阻是重要影响因素。由于不带电且含有简单的烷基链间隔臂,NHS-Biotin是膜通透性的,可用于细胞内标记。

NHS-Biotin是最常用的生物素化试剂。NHS活化的生物素可以有效地与碱性缓冲液中的伯胺基(-NH2)反应形成稳定的酰胺键。蛋白或抗体通常都含有几个伯胺,可作为标记的靶标,包括赖氨酸残基的侧链以及每个多肽的N末端。

参考文献:
Fouassier, L. , Yun, C. C., Fitz, J. G. and Doctor, R. B. (2000). Evidence for Ezrin-Radixin-Moesin-binding Phosphoprotein 50 (EBP50) Self-association through PDZ-PDZ Interactions. J. Biol. Chem. 275, 25039-25045.
Nunomura, W. , Takakuwa, Y., Parra, M., Conboy, J.G., & Mohandas, N. (2000) Regulation of protein 4.1R, p55 and glycophorin C ternary complex in human erythrocyte membrane. J. Biol. Chem. 275(32): 24540-24546.
Chiu, N. H. & T.K. Christopoulos. 1999. Two-site expression immunoassay using a firefly luciferase-coding DNA label. Clin. Chem. 45: 1954–1959..

文献引用

Features

• Protein labeling—biotinylate antibodies or other proteins for detection or purification using streptavidin probes or resins
• Intracellular labeling—membrane-permeable, can be used to label inside cells
• Amine-reactive—reacts with primary amines (-NH2), such as the side-chain of lysines (K) or the N-terminal-amine
• Irreversible—forms permanent amide bonds; spacer arm cannot be cleaved
• Solubility—water insoluble, must be dissolved in DMSO or DMF before further dilution in aqueous buffers
• Very short—spacer arm is 13.5 angstroms; it consists of the native biotin valeric acid group only

化学属性

Physical AppearanceA solid
StorageDesiccate at -20°C
M.Wt341.38
Cas No.35013-72-0
FormulaC14H19N3SO5
SynonymsBiotin N-hydroxysuccinimide ester, Biotin-OSU, Biotin NHS, Biotin SE
Solubilityinsoluble in EtOH; insoluble in H2O; ≥17.07 mg/mL in DMSO
Chemical Name(2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 5-[(3aS,4S,6aR)-2-oxo-1,3,3a,4,6,6a-hexahydrothieno[3,4-d]imidazol-4-yl]pentanoate
SDFDownload SDF
Canonical SMILESC1CC(=O)N(C1=O)OC(=O)CCCCC2C3C(CS2)NC(=O)N3
运输条件 蓝冰运输或根据您的需求运输。
一般建议不同厂家不同批次产品溶解度各有差异,仅做参考。若实验所需浓度过大至产品溶解极限,请添加助溶剂助溶或自行调整浓度。溶液形式一般不宜长期储存,请尽快用完。

试验操作

生物素化方法[1]:

样品

红细胞

溶解方法

可以溶于DMSO或DMF。

反应条件

30分钟

应用

首先,用DMSO将NHS-biotin溶解成100 mg/mL,然后用90%的DMSO溶液将其稀释到20 mg/mL。用0.2 μm孔径的注射过滤器对Biotin溶液进行过滤消毒后,再用6倍体积的0.9%生理盐水将Biotin溶液再次稀释。在加NHS-biotin溶液标记血液前,先将血液平衡到室温。Biotin-DMSO生理盐水溶液注入到血袋中并搅拌混匀30 min,可以得到生物素浓度为0.04 pg的红细胞biotin。

References:

[1]. J.E. Tomlinson, E. Taberner, R.C. Boston, S.D. Owens, and R.D. Nolen-Walston. Survival Time of Cross-Match Incompatible Red Blood Cells in Adult Horses. J Vet Intern Med 2015;29:1683–1688

生物活性

描述 NHS-Biotin是一种最简单的NHS-酯活化的生物素化试剂,可用于细胞内标记。
靶点 intracellular proteins          
IC50            

质量控制